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txyamy

木虫 (小有名气)


[交流] 蛋白纯化中Tris-咪唑的作用是什么?Tris-HCl呢?两者区别大吗?

RT: 请高手指点呀柱层析,平衡buf中Tris-咪唑的与Tris-HCl的区别是什么呢?他们的作用分别是?
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★
txyamy(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-11-17 12:07:39
Tris-HCl只是众多平衡缓冲液中的一种而已,一般在碱性条件下使用,多用于阴离子交换层析和金属螯合层析。而咪唑比起histag,具有更强的结合金属离子(镍,铜,锌)的能力,因此多用于histag蛋白的洗脱。
4楼2011-11-16 21:33:54
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zc10052157

新虫 (正式写手)


★ ★
txyamy(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-11-16 16:30:57
咪唑竞争his-tag跟镍柱结合    使蛋白脱落下来
2楼2011-11-16 15:20:03
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啊Q精神

木虫 (小有名气)


★ ★ ★ ★
txyamy(金币+1):谢谢参与
silicare(金币+3, BioEPI+1): 谢谢参与 2011-11-16 16:30:49
txyamy(金币+8): 我的是DEAE-Sepharose Fast Flow d 2011-11-16 17:28:47
平衡都是为了先去除柱子中的杂质,而创造与蛋白结合的最优条件。而咪唑和Tris-Cl,作用不一样,咪唑是竞争性洗脱,而Tris-Cl是pH值洗脱。
3楼2011-11-16 15:53:19
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txyamy(金币+1): 谢谢参与
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6楼2021-04-30 15:33:44
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