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求助:天然药化的几个常见问题
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姿姿可爱
金虫
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虫号: 923378
[交流]
求助:天然药化的几个常见问题
本人新手,向各位高手请教几个天然药化的常见问题:
1. 怎样将TLC的条件转移至色谱柱上?是先摸索最优的分离系统后再将极性降低,使最上面的点(或者感兴趣的点)的Rf值为0.2-0.3吗?
2. 梯度洗脱时怎样确定换梯度的极性和时机,如果采用固定体积的梯度洗脱方式,一般一个梯度冲多少体积?如果采用TLC指导洗脱,怎样确定更换极性的时间?梯度要怎样设计?
这些问题感觉对分离效果影响很大,谢谢指导!
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1楼
2011-11-15 21:45:34
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平常心11
金虫
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在线: 67.1小时
虫号: 1372872
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂
用什么稀释?水吗?
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5楼
2011-11-16 09:16:43
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gm2006
铜虫
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虫号: 823099
★ ★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 08:43:27
姿姿可爱(金币+2): 谢谢交流! 2011-11-16 12:03:51
依次作答:1.先选用合适的色谱柱,再用TLC洗脱条件冲洗就行;将感兴趣的点的Rf值调为0.2-0.3很合适
2.将一个点快冲完时就可换梯度,如果采用固定体积的梯度洗脱方式,应根据色谱柱和样品量来决定洗脱体积;如果采用TLC指导洗脱,怎样确定更换极性的时间?将一个点快冲完即可;梯度要怎样设计?一般要盯住某个点,以此作为参照冲洗,冲完后再换点。
互相学习一下,呵呵!
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2楼
2011-11-15 21:58:34
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星辰水月1987
木虫
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在线: 236.6小时
虫号: 1389412
★ ★
小木虫(金币
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):给个红包,谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 08:46:05
姿姿可爱(金币+2): 多谢交流! 2011-11-16 12:04:16
一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂,某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时,多尝试几种比例不同,成分不同的展开剂。展开剂的极性太小,点分不开,极性太大,也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右为最佳。
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4楼
2011-11-16 08:35:19
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mjc_2011
铜虫
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虫号: 1366484
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
肯定不能用水稀释了,你本来要让极性变小的加水岂不南辕北辙了吗!呵呵、、、应用你所用的展开剂中极性最小的容积进行适当稀释!
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6楼
2011-11-16 09:36:35
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