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姿姿可爱

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 245.5
帖子: 774
在线: 141.5小时
虫号: 923378

[交流] 求助：天然药化的几个常见问题

本人新手，向各位高手请教几个天然药化的常见问题：
1. 怎样将TLC的条件转移至色谱柱上？是先摸索最优的分离系统后再将极性降低，使最上面的点（或者感兴趣的点）的Rf值为0.2-0.3吗？
2. 梯度洗脱时怎样确定换梯度的极性和时机，如果采用固定体积的梯度洗脱方式，一般一个梯度冲多少体积？如果采用TLC指导洗脱，怎样确定更换极性的时间？梯度要怎样设计？
这些问题感觉对分离效果影响很大，谢谢指导！

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1楼 2011-11-15 21:45:34

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星辰水月1987

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 2825.5
帖子: 428
在线: 236.6小时
虫号: 1389412

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 08:46:05
姿姿可爱(金币+2): 多谢交流！ 2011-11-16 12:04:16

一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂，某种样品在这种展开剂中只显示一个点，并不等于在别的展开剂中也只显示一个点。因此在寻找展开剂时，多尝试几种比例不同，成分不同的展开剂。展开剂的极性太小，点分不开，极性太大，也分不开.一般以目标产物的Rf值在0.3左右为最佳。

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4楼2011-11-16 08:35:19

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gm2006

铜虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 229.9
帖子: 91
在线: 33.4小时
虫号: 823099

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
jiangchunyong(金币+1): 谢谢 2011-11-16 08:43:27
姿姿可爱(金币+2): 谢谢交流！ 2011-11-16 12:03:51

依次作答：1.先选用合适的色谱柱，再用TLC洗脱条件冲洗就行；将感兴趣的点的Rf值调为0.2-0.3很合适
2.将一个点快冲完时就可换梯度，如果采用固定体积的梯度洗脱方式，应根据色谱柱和样品量来决定洗脱体积；如果采用TLC指导洗脱，怎样确定更换极性的时间？将一个点快冲完即可；梯度要怎样设计？一般要盯住某个点，以此作为参照冲洗，冲完后再换点。
互相学习一下，呵呵！

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2楼2011-11-15 21:58:34

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