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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)

[求助] 表面活性剂薄层层析

各位高手:
最近在分离纯化物质的时候遇到困难,请大家不吝赐教。
是这样的我有两份样品,一份的溶剂是甲醇,总共含有大约5种物质,有两种目标物质,一种是脂肽,一种是糖脂,(当然这五种物质的极性都较大,可以称之为极性样品),用制备型TLC板根本分不开。尝试用过反相柱,反相柱的原理是非极性的杂质结合到柱子上,达到除去杂质的目的,但是效果不佳,原因应该是这几种物质极性虽然有差异,但是总体来说,都是极性较大的(因为他们都溶于甲醇),我想直接用正向柱,但是由于溶剂是甲醇,(根据资料,甲醇能溶解硅胶),所以没敢用,(但是根据资料,正向柱可以用甲醇作为洗脱剂),所以我很纠结,到底能不能用甲醇样品直接上正向柱??还有就是洗脱剂的选择也很麻烦。我到底该怎么办啊?大家出出主意,如何把我的目的物质单独分离出来呢?


一份的溶剂是二氯甲烷,总共含有大约7-8种物质,有两种目标物质,两种糖脂,(当然这8种物质的极性都相对较小,可以称之为非极性)如何把我的目的物质单独分离出来呢?用制备型TLC板根本分不开。我也尝试了用正向柱,原理就是把杂质结合在柱子上,但是效果不佳,不能有效除去杂质。大家出出主意,如何把我的目的物质单独分离出来呢?(图为二氯甲烷样品)

二氯甲烷样品 分析型TLC碘显色



二氯甲烷样品 分析型TLC糖脂显色
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sky10016

木虫 (著名写手)


wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-14 16:20:14
你做的是脂肽类的物质吗?我也是做脂肽类的物质的。
我的做法是先用HPLC分析,再上硅胶柱砍断,最后进行制备。

如果你的粗物质多的话,可以尝试一下硅胶柱层析砍断。再分析。
不知道对你是否有用。
方寸间,历数世上桑田沧海;时空里,细问人间暑往寒来;是朋友,星移斗转情不改;是知音,天涯海角记心怀。
2楼2011-11-14 14:08:26
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by cailingzhi89 at 2011-11-14 10:50:35:
各位高手:
最近在分离纯化物质的时候遇到困难,请大家不吝赐教。
是这样的我有两份样品,一份的溶剂是甲醇,总共含有大约5种物质,有两种目标物质,一种是脂肽,一种是糖脂,(当然这五种物质的极性都较大,可 ...

其实最初是用氯仿甲醇1:1抽提的,然后我用二氯甲烷抽提,二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了,这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的,用HPLC可能比较麻烦,二楼的意思是直接用氯仿甲醇1:1抽提物上硅胶柱?
3楼2011-11-14 14:27:39
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)


wanhscn(金币+1): 鼓励交流! 2011-11-14 16:20:25
引用回帖:
2楼: Originally posted by sky10016 at 2011-11-14 14:08:26:
你做的是脂肽类的物质吗?我也是做脂肽类的物质的。
我的做法是先用HPLC分析,再上硅胶柱砍断,最后进行制备。

如果你的粗物质多的话,可以尝试一下硅胶柱层析砍断。再分析。
不知道对你是否有用。

其实最初是用氯仿甲醇1:1抽提的,然后我用二氯甲烷抽提,二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了,这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的,用HPLC可能比较麻烦,二楼的意思是直接用氯仿甲醇1:1抽提物上硅胶柱?
4楼2011-11-14 14:28:06
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sky10016

木虫 (著名写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cailingzhi89 at 2011-11-14 14:28:06:
其实最初是用氯仿甲醇1:1抽提的,然后我用二氯甲烷抽提,二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了,这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的,用HPLC可能比较麻烦,二楼的意思是直接用氯仿甲醇1:1抽 ...

先用HPLC分析一下再说。
如果粗品质量大的话试试硅胶柱是可以的。
我做的时候也是先用硅胶柱砍断的。
方寸间,历数世上桑田沧海;时空里,细问人间暑往寒来;是朋友,星移斗转情不改;是知音,天涯海角记心怀。
5楼2011-11-15 09:57:02
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by sky10016 at 2011-11-15 09:57:02:
先用HPLC分析一下再说。
如果粗品质量大的话试试硅胶柱是可以的。
我做的时候也是先用硅胶柱砍断的。

你的意思是直接用氯仿甲醇1:1的初提物过硅胶柱?还是?这样的话样品极性会不会太大?溶解硅胶?
6楼2011-11-16 11:37:02
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sky10016

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
wanhscn(金币+4): 热心!鼓励!根据情况,适时授予专家指数~ 2011-11-17 00:20:26
引用回帖:
6楼: Originally posted by cailingzhi89 at 2011-11-16 11:37:02:
你的意思是直接用氯仿甲醇1:1的初提物过硅胶柱?还是?这样的话样品极性会不会太大?溶解硅胶?

为什么不先试试呢?普通的柱层析硅胶(200~300目的)可以用纯甲醇跑柱子的。没听过什么溶剂会溶解硅胶的。

做之前最好进HPLC分析一下,看看样品的物质的含量有多少。心里有数。

希望对你能有所帮助。
方寸间,历数世上桑田沧海;时空里,细问人间暑往寒来;是朋友,星移斗转情不改;是知音,天涯海角记心怀。
7楼2011-11-16 19:47:50
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