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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 表面活性剂薄层层析
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)

[求助] 表面活性剂薄层层析

各位高手：
最近在分离纯化物质的时候遇到困难，请大家不吝赐教。
是这样的我有两份样品，一份的溶剂是甲醇，总共含有大约5种物质，有两种目标物质，一种是脂肽，一种是糖脂，（当然这五种物质的极性都较大，可以称之为极性样品），用制备型TLC板根本分不开。尝试用过反相柱，反相柱的原理是非极性的杂质结合到柱子上，达到除去杂质的目的，但是效果不佳，原因应该是这几种物质极性虽然有差异，但是总体来说，都是极性较大的（因为他们都溶于甲醇），我想直接用正向柱，但是由于溶剂是甲醇，(根据资料，甲醇能溶解硅胶)，所以没敢用，（但是根据资料，正向柱可以用甲醇作为洗脱剂），所以我很纠结，到底能不能用甲醇样品直接上正向柱？？还有就是洗脱剂的选择也很麻烦。我到底该怎么办啊？大家出出主意，如何把我的目的物质单独分离出来呢？


一份的溶剂是二氯甲烷，总共含有大约7-8种物质，有两种目标物质，两种糖脂，（当然这8种物质的极性都相对较小，可以称之为非极性）如何把我的目的物质单独分离出来呢？用制备型TLC板根本分不开。我也尝试了用正向柱，原理就是把杂质结合在柱子上，但是效果不佳，不能有效除去杂质。大家出出主意，如何把我的目的物质单独分离出来呢？（图为二氯甲烷样品）

二氯甲烷样品 分析型TLC碘显色



二氯甲烷样品 分析型TLC糖脂显色
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1楼 2011-11-14 10:50:35
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sky10016

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cailingzhi89 at 2011-11-14 14:28:06:
其实最初是用氯仿甲醇1：1抽提的，然后我用二氯甲烷抽提，二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了，这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的，用HPLC可能比较麻烦，二楼的意思是直接用氯仿甲醇1：1抽 ...

先用HPLC分析一下再说。
如果粗品质量大的话试试硅胶柱是可以的。
我做的时候也是先用硅胶柱砍断的。
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方寸间，历数世上桑田沧海；时空里，细问人间暑往寒来；是朋友，星移斗转情不改；是知音，天涯海角记心怀。
5楼2011-11-15 09:57:02
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sky10016

木虫 (著名写手)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流！ 2011-11-14 16:20:14
你做的是脂肽类的物质吗？我也是做脂肽类的物质的。
我的做法是先用HPLC分析，再上硅胶柱砍断，最后进行制备。

如果你的粗物质多的话，可以尝试一下硅胶柱层析砍断。再分析。
不知道对你是否有用。
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方寸间，历数世上桑田沧海；时空里，细问人间暑往寒来；是朋友，星移斗转情不改；是知音，天涯海角记心怀。
2楼2011-11-14 14:08:26
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by cailingzhi89 at 2011-11-14 10:50:35:
各位高手：
最近在分离纯化物质的时候遇到困难，请大家不吝赐教。
是这样的我有两份样品，一份的溶剂是甲醇，总共含有大约5种物质，有两种目标物质，一种是脂肽，一种是糖脂，（当然这五种物质的极性都较大，可 ...

其实最初是用氯仿甲醇1：1抽提的，然后我用二氯甲烷抽提，二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了，这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的，用HPLC可能比较麻烦，二楼的意思是直接用氯仿甲醇1：1抽提物上硅胶柱？
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3楼2011-11-14 14:27:39
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cailingzhi89

新虫 (初入文坛)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流！ 2011-11-14 16:20:25
引用回帖:
2楼: Originally posted by sky10016 at 2011-11-14 14:08:26:
你做的是脂肽类的物质吗？我也是做脂肽类的物质的。
我的做法是先用HPLC分析，再上硅胶柱砍断，最后进行制备。

如果你的粗物质多的话，可以尝试一下硅胶柱层析砍断。再分析。
不知道对你是否有用。

其实最初是用氯仿甲醇1：1抽提的，然后我用二氯甲烷抽提，二氯甲烷抽提后剩下的固体物质加入甲醇很快就容了，这就是怎么把样品分成二氯甲烷和甲醇部分的，用HPLC可能比较麻烦，二楼的意思是直接用氯仿甲醇1：1抽提物上硅胶柱？
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4楼2011-11-14 14:28:06
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