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二次PCR产物弥散
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银虫
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虫号: 1050090
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
[
求助
]
二次PCR产物弥散
第一轮PCR 产物微弱(上图),第二轮PCR用第一轮的产物做模板,无论模板稀释多少倍,怎么调整引物浓度和退火温度,结果都是如下图般——一片弥散带。求助高手这该怎么办呢?郁闷中。
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1楼
2011-11-10 14:11:15
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qqm8445
金虫
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在线: 195.6小时
虫号: 811725
注册: 2009-07-19
性别:
MM
专业: 畜牧学
稀释模板呀,稀释个100倍了甚至更多,你可以做个梯度,问题就可以解决了。
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12楼
2012-04-13 08:33:53
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jeffzm
铁虫
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应助: 0
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虫号: 1336237
注册: 2011-07-02
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★
wanhscn(金币+2): 有可能! 2011-11-14 16:19:26
我觉得可能,也许,染胶的时候是不是有其它DNA污染,胶回收的时候回收的不纯。
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3楼
2011-11-14 15:12:19
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longrna
新虫
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虫号: 1473815
注册: 2011-11-03
性别: GG
专业: 生物化学
遇到过同样的情况,还迷散的更厉害都有。。。。
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伟大航线....
4楼
2011-11-14 16:20:16
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shuangzi8761
银虫
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注册: 2011-10-18
性别: GG
专业: 植物病理学
【答案】应助回帖
占个位子 坐等答案 我也觉得奇怪 另外楼主为何要做二次PCR?
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5楼
2011-11-14 20:56:37
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