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lanhui_yang

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC 进样第一针总是走不好的原因?

做液相制备,柱子平衡很长时间,进相同样品,第一针总是走不好,分离效果很差,消耗时间短。第二针分离效果明显好于第一针。从第三针开始稳定出峰,且分离情况均良好。连续好几天都是这种情况。各位大侠,能否帮忙解释下这种现象的原因?
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加油加油加油
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ntzsl

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
408851978(金币+2): 虽然不是问题的答案,但是分析出了梯度洗脱的问题 2011-11-11 13:13:50
lanhui_yang(金币+2): 2011-11-14 12:55:07
这种情况是由于你的流动相的问题,估计没错你是用的梯度洗脱吧。平衡的时候极性个走样的极性相差很大造成的。在平衡的时候色谱柱的填料基团发生倒伏,所以你每次平衡后第一针会走不好。然后随着时间,原来倒伏的基团又会重新立起来,后面的图谱会越来越趋于稳定。
大家互相学习
2楼2011-11-10 13:55:03
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ntzsl at 2011-11-10 13:55:03:
这种情况是由于你的流动相的问题,估计没错你是用的梯度洗脱吧。平衡的时候极性个走样的极性相差很大造成的。在平衡的时候色谱柱的填料基团发生倒伏,所以你每次平衡后第一针会走不好。然后随着时间,原来倒伏的基 ...

走的是等度,第二天进同一样品还是第一针分离很差
加油加油加油
3楼2011-11-10 15:46:12
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王

【答案】应助回帖

应该是没有平衡好吧!
永远不要带着问题去找你的上司!
4楼2011-11-10 16:04:38
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zhaolianhai

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你洗阀了吗,要不就是你的阀有死体积,把阀好好洗洗
5楼2011-11-10 17:19:47
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ntzsl

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ntzsl at 2011-11-10 13:55:03:
这种情况是由于你的流动相的问题,估计没错你是用的梯度洗脱吧。平衡的时候极性个走样的极性相差很大造成的。在平衡的时候色谱柱的填料基团发生倒伏,所以你每次平衡后第一针会走不好。然后随着时间,原来倒伏的基 ...

那你平衡的流动相和走样的流动相一样吗?我们以前遇到这种问题,和你说的情况一样的,一直找不出原因,后来打电话问工程师才知道是因为极性变化太大了造成的。
大家互相学习
6楼2011-11-10 18:26:53
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lanhui_yang

金虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by ntzsl at 2011-11-10 18:26:53:
那你平衡的流动相和走样的流动相一样吗?我们以前遇到这种问题,和你说的情况一样的,一直找不出原因,后来打电话问工程师才知道是因为极性变化太大了造成的。

流动相是一样的,有没有能改善的方法?否则第一针总是收集不到目标馏分。
加油加油加油
7楼2011-11-11 10:43:16
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TLC菜鸟

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先,柱子平衡好了没?
其次,仪器基线之类的有没有调校
然后,可能是仪器还未稳定
只为活个问心无愧。。
8楼2011-11-11 12:57:21
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爱雪飘飘

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

建议你第一针走个空白好了,可能是你系统没有平衡好
专业维修保养核潜艇、核动力航母、各类反应堆更换燃料棒、核弹头翻新改装、抛光、打蜡、回收二手航母、清洗航母油槽、反应堆、航天飞机保养换三滤.高空作业擦洗
9楼2011-11-11 14:13:22
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slg102

木虫 (小有名气)

没有平衡好
10楼2011-11-11 15:22:48
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