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小木虫论坛-学术科研互动平台» 网络生活区» 有奖问答 » 有奖问答完结子版 » HPLC的10ul进样和20ul进样有啥子不一样？
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裸奔的小蜗牛

银虫 (小有名气)

[求助] HPLC的10ul进样和20ul进样有啥子不一样？

我做的HPLC是手动进样，有一个进样针是100ul量程的。药典中有10ul进样和20ul进样
它们有啥不一样？怎么10ul进样？谢谢各位仁兄，老师指教
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把钱当自己的，你就已经输了
1楼2011-11-21 22:49:32
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tuobaohua

荣誉版主 (文坛精英)

投资理财发言人

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
quiller2000(金币+2): 感谢分享！ 2011-11-23 08:51:15
进样量会影响你的出峰面积
如果你的检测物的浓度始终在线性范围，那么进样20微升检测出的HPLC峰面积会是进样10微升的峰面积的两倍
你是手动进样，可以有两种方式来控制进样10微升：
1，在进样针上调，使进样量为10微升，这个的准确度不是很好，主要靠你的眼睛和手来操作，产生误差的可能性很大；
2，在仪器的进样口调动，后面有几个固定的进样值，我忘了有没有10微升的了，但是肯定有20微升的，我用的是Agilent的仪器
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2楼2011-11-22 09:01:55
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wzh836270

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
tuobaohua(金币+1): 鼓励交流！ 2011-11-22 14:07:59
有10微升的针，不过一般的都有定量环啊！而且都是20的定量环，手动进样可定每次把握的体积不一样吧！
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没有什么可以挥霍的时候，珍惜自己的青春！
3楼2011-11-22 11:13:18
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zncyet

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
tuobaohua(金币+1): 鼓励交流！ 2011-11-22 14:08:16
对于要求使R值低的两峰R值提升可使用低剂量，但是会出现峰低
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4楼2011-11-22 11:27:08
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胡杨树hd

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
tuobaohua(金币+2): 欢迎常来参与交流！ 2011-11-22 14:09:13
手动进样会在定量环内有脉冲，以20微升定量环为例，当进样0-10微升的时候，脉冲未到定量环的末端，样品全在定量环内;当进样量大于或等于60微升的时候，可以消除脉冲引起的样品稀释；当进样量在两者之间时，由于脉冲影响，会造成样品稀释。
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5楼2011-11-22 13:50:51
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qiong019

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
tuobaohua(金币+2): 常来科研经验版交流！ 2011-11-22 15:41:04
就像楼上所说，进样量影响出峰面积，但是进样量也与柱容量有关系，如果进样量过大超过柱容量，可能无法得到良好的分离，如果进样量太小可能会漏掉小峰，我用的是戴安的仪器，进样量由六通阀的定量环决定
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6楼2011-11-22 15:18:25
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zsc2099

金虫 (初入文坛)

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★ ★
tuobaohua(金币+2): 鼓励新虫，常来科研版交流哈！ 2011-11-23 07:57:00
进样量不一样的话，对于柱子来说，柱压不同了；对柱子的污染程度不同

对于响应的影响这个是必然的了，没什么好说的。

没用过手动的，现在好像都是自动进样器了吧。。。
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我在故我思
7楼2011-11-22 23:58:45
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quiller2000

木虫 (著名写手)

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非专业水平的都还是用定量环的！做QC都是机器人做的话吧！
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致良知
8楼2011-11-23 08:52:16
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lei206yan

新虫 (小有名气)

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★
tuobaohua(金币+1): 鼓励新虫，欢迎常来！ 2011-12-28 08:36:14
药典中要求进样10微升或是20微升应该是根据各品种色谱条件的方法学验证所得出的。一般手动进样器中的定量环都是20微升的，要想进样量为10微升应改用微量进样器取10微升进样，但是这样准确度和重现性就差了。
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坚持就是胜利！
9楼2011-11-25 10:46:45
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裸奔的小蜗牛

银虫 (小有名气)
微量进样器，你看100ul的进10ul行不？？
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把钱当自己的，你就已经输了
10楼2011-11-25 23:11:20
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