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未末

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教siRNA转染的几个问题已有3人参与

各位战友好~~~~~我是一名研究生新生,悲催的要做siRNA,但是我们实验室又没有这方面经验和技术,于是只能自己摸索了。。有些菜鸟级的问题,还请各位专家高手不吝赐教!!!

     
       ①在做siRNA电泳和转染等等实验时,血清,培养液,胰酶等培养物质如何去除RNase? 还是新开封的应该没有RNase呢,但是用了几次之后呢?
       ②siRNA很容易降解,那么可以对含siRNA的聚合物纳米粒做诸如粒径、透射电镜、紫外等等实验吗(目的是考察siRNA跟我们实验用聚合物复合成的纳米粒的性质)?
       ③siRNA 跟DNA的性质差别有多大?DNA的转染可否模拟siRNA?做转染实验可以先用eGFP,PGL-3之类的DNA报告基因来检测我的聚合物的转染效率吗?
       ④关于转染浓度。园子里的专家们说siRNA的作用浓度是10~100nM。但是我们从公司买来的总共才5nmol,就要近两千块了,这么用怎么吃得消啊。。。求助浓度用pmol级的可以吗?
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704361326

金虫 (正式写手)

恩恩

【答案】应助回帖

我也刚做不久,相互讨论
1. 这个可以考虑,但没办法。枪尖、EP管类制品要用进口的。你可以看进口ep的包装盒,是去RNase的哦!
2.我也会大不了
3. 我觉得可以,我也正准备这样尝试。原因:目的RNA很贵,我有其他的,就先尝试做转染,虽然有差别,但大致相通啊。

以上建议,仅作参考。
我也在做siRNA,你好像是药剂方向的。多多讨论哦!
踏踏实实地走好自己的路
7楼2015-05-26 17:12:19
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