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未末

新虫 (初入文坛)

[求助] 请教siRNA转染的几个问题已有3人参与

各位战友好~~~~~我是一名研究生新生,悲催的要做siRNA,但是我们实验室又没有这方面经验和技术,于是只能自己摸索了。。有些菜鸟级的问题,还请各位专家高手不吝赐教!!!

     
       ①在做siRNA电泳和转染等等实验时,血清,培养液,胰酶等培养物质如何去除RNase? 还是新开封的应该没有RNase呢,但是用了几次之后呢?
       ②siRNA很容易降解,那么可以对含siRNA的聚合物纳米粒做诸如粒径、透射电镜、紫外等等实验吗(目的是考察siRNA跟我们实验用聚合物复合成的纳米粒的性质)?
       ③siRNA 跟DNA的性质差别有多大?DNA的转染可否模拟siRNA?做转染实验可以先用eGFP,PGL-3之类的DNA报告基因来检测我的聚合物的转染效率吗?
       ④关于转染浓度。园子里的专家们说siRNA的作用浓度是10~100nM。但是我们从公司买来的总共才5nmol,就要近两千块了,这么用怎么吃得消啊。。。求助浓度用pmol级的可以吗?
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2011加油

银虫 (正式写手)

我也想设计siRNA,请问你是怎么设计,来确定想要的siRNA片段?谢谢回答,期待回复。
每天都是新开始,2011,要好好努力!
3楼2011-11-11 14:32:22
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2011加油

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 未末 at 2011-11-14 13:41:04:
这个不是我设计的,呵呵,不好意思了~~真桑心,木有人回复。。。

你们实验室买的是现成的吗?这也很好啊,省去很多麻烦
每天都是新开始,2011,要好好努力!
5楼2011-11-14 20:01:22
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