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happyxiaoli铜虫 (小有名气)
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大鼠气管上皮细胞培养方法 已有1人参与
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我最近做大鼠气管上皮细胞原代培养，用酶消化法，用了好几种没消化，得到的细胞数都特别少。 我的方法是：取大鼠2只，麻醉后，在无菌条件下取气管，用冷的PBS液冲洗，分离除去其他粘膜组织，再用PBS（含青-链双抗）液冲洗3遍，结扎一端，灌入0.25%胰酶，结扎另一端，4度，冰箱过夜。剪开结扎线，加入10%的小牛血清的DMEM培养液终止消化。将液体转移置于10ml离心管中，1000r/min,10min.培养液冲洗重复一次，加培养液吹达成细胞悬液，计数，发现，细胞的数量特别少。做了好几次都是一样的结果，我还试了0.25%中性蛋白酶，结果差不多。 现在找不出原因，请师哥师姐，朋友们帮帮忙，帮我分析一下，非常感谢！！！急！急！急！ |
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