| 查看: 4077 | 回复: 20 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
H-xiangzhu金虫 (正式写手)
|
[求助]
微生物胞内物质与胞外代谢产物提取
|
|
|
我要提取微生物胞内和胞外代谢产物，要去除杂蛋白质和菌体等，离心沉淀后， 1、上清液我加入草酸沉淀，后面加入丙酮溶解后离心去沉淀，请问丙酮我怎么去除呢？ 2、对于胞内蛋白，我加入无水乙醇超声波破碎，后面离心去除沉淀，可是我的上清液中有无水乙醇，请问用什么方法可以把无水乙醇去除呢？ 补充：1、我试验样品很少，就只有小几ml这样 2、我们实验室只有真空泵，没有旋转蒸发仪和吹氮仪 |
回复此楼» 猜你喜欢
真诚求助：手里的省社科项目结项要求主持人一篇中文核心，有什么渠道能发核心吗
已经有8人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有5人回复
-
论文投稿，期刊推荐
已经有6人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
孩子确诊有中度注意力缺陷
已经有14人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有5人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有3人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有4人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
21楼2015-07-03 14:05:52
2楼2011-11-07 13:02:19
H-xiangzhu
金虫 (正式写手)
- 应助: 11 (小学生)
- 金币: 214.2
- 散金: 10
- 帖子: 470
- 在线: 62.7小时
- 虫号: 1277725
- 注册: 2011-04-25
- 性别: MM
- 专业: 生物防治
3楼2011-11-07 13:56:38
HarveyWang
捐助贵宾 (知名作家)
海外行者
- MicEPI: 15
- 应助: 80 (初中生)
- 金币: 2277.2
- 散金: 24
- 红花: 65
- 帖子: 6880
- 在线: 946小时
- 虫号: 528557
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 微生物生理与生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): good，看lz的反馈，lz反馈好可以向版主申请个EPI啊^_^ 2011-11-07 14:14:07
H-xiangzhu(金币+1): 2011-11-07 15:23:40
zhang8826857(金币+3): good，看lz的反馈，lz反馈好可以向版主申请个EPI啊^_^ 2011-11-07 14:14:07
H-xiangzhu(金币+1): 2011-11-07 15:23:40
|
1.我一般就是放在通风橱几个小时，丙酮很快就挥发完了。剩余的主要是水分溶液。 乙醇的较难挥发，几个小时后放在40摄氏度的抽真空的恒温箱中，大约一个小时可以抽完剩余水分。 2.注意事项！ 这时候要注意，你到底是测什么？！！ 例如你要是测定发酵液的乙酸，肯定是要再抽之前加6M NaOH少许，将溶液变碱。因为在酸性条件下，乙酸在最后快抽干的时候要挥发的! 3.无论是丙酮还是乙醇，除蛋白的效果走不足以立即上液相柱子。其中会有不少的蛋白残留。即使是使用80%以上的乙醇。不信，你可以拿BSA蛋白做下测试，看看跟三氯乙酸相比，能不能有多少蛋白沉淀。 但是，这一步中有一个很好的去处蛋白的方法。就是最后的干燥抽真空步骤。当接近干燥的时候，所有的细胞蛋白都回变性沉淀的！ 就是说，对于干燥抽干的样品，你只要用水溶液溶解，然后10000 rpm离心5-10分钟，上清中就几乎没有蛋白了。 细胞蛋白都回变成一团沉在管子的底部。上清你可以直接上样过柱子。 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
H-xiangzhu4楼2011-11-07 14:10:46