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涛声依旧本人

银虫 (初入文坛)

[交流] HEPES缓冲液相关问题 已有3人参与

我做肿瘤细胞脂筏提取要用Modified HEPES buffer: 25mMHEPES-HCl, pH6.5, 150mMNaCl, 1mMEDTA, 1mMPMSF, protease inhibitor cocktail.可是看到的是Tris-HCl 缓冲液,用他们陪细胞裂解液有区别吗?或者说可以换吗?
Tris-HCl 缓冲液:Western及IP细胞裂解液的主要成分为20mM Tris(pH7.5),150mM NaCl,1% Triton X-100,以及sodium pyrophosphate,β-glycerophosphate,EDTA,Na3VO4,leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解,并维持原有的蛋白间相互作用。
其中的HEPES缓冲液是25mM HEPES, pH 6.5, 150mM NaCl,1mM EDTA, 1 mM PMSF,我配10ml的,用的是HEPES0.0596g/10ml,NaCL0.0878g/10ml,EDTA0.0029g/10ml,其中分子量HEPES是238.3,NaCl的分子量是58.5,EDTA分子量是292.25
怎么我配的不溶解啊
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youngker918

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-11-08 19:53:56
大量的HEPES会与水在HEPES表面形成隔水膜,阻挡水跟里面的HEPES接触,称的时候或是加到水里后用玻棒捣碎即可
天才就怕不够天才,坏又不够坏,天天都想离开,却不知何处才能换骨脱胎
3楼2011-11-03 13:38:01
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