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doudouxiong

铜虫 (小有名气)

[求助] 试剂盒能否在我的实验中使用

各位前辈,我的实验第一步是提取DNA,后面要做SSR及同源克隆等,但是由于我提取的是真菌的孢子,存在的问题是孢子量很少,而且孢子破壁很困难。为了解决孢子量少的问题,前一段时间我用了液氮研磨法、液氮加石英砂研磨法、直接CTAB研磨法等使孢子尽量破壁,但是效果都不理想,提到的DNA要么检测不出来,要么被机械破坏,机械破坏是研磨过程中造成的,可是不尽力研磨的话孢子破不了啊,本来孢子就没多少。当然有同学跟我说,没检测出来的DNA可以直接做PCR的,而且有条带,可是我不想冒着这样的风险,最好还是检测出来比较好。于是实在没有办法的情况下,我想试一下试剂盒,可是师姐说试剂盒提的少而且效果不一定好,那么针对我这种材料少到1—5mg的且难破壁的东西来说,试剂盒能提出来吗?或者说提出来会不会出现没有条带之类的情况出现啊!
番外:主要是破壁困难,孢子的量倒是能够加大一些到10mg左右~
求助,小女子在这里跪谢了~
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longrna

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

doudouxiong(金币+5): 2011-11-03 22:59:12
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