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qiuniao

铜虫 (小有名气)

[求助] 空白样中加标 却找不到标准品峰 哪去了呢

有老板等于没老板 老板是放羊的 2个月没有开组会了 也找不到人影 即使找到了 也不能给我什么指点 老板不是做分析的  还不如各位虫迷们!
遇到个问题,我检测的是一种氨基酸,需要蛋白水解后,检测水解液。 这个物质还有一种就是游离态的不需要水解。
比如我称了n g 空白样后,加入三氯乙酸后,4度过夜后,离心,取上清,按说加进去的标准品应该是在上清液中,标准品是盐酸盐,用水溶的。沉淀部分就继续水解,得水解液。
可是在加标样中却找不到标准品的峰,哪去了呢?
我是按照老外的文献上操作的,并且此方法已经有很多人引用,发了几篇PNAS,TOXICON, 作为环境系的,能发这样的文章已经很不错了。不是专业学化学的。研究生做微生物,博士生做分析,本来对化学就不感兴趣,无奈于老板的课题需要,无奈。
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不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by 光辉 at 2011-10-31 08:59:39:
氨基酸分析?液相?
要衍生的吧,用的什么衍生试剂?稳定性呢

用的是waters AccQ 衍生方法包
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5楼2011-10-31 10:39:19
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 408851978 at 2011-10-31 09:09:05:
是否加标量太少了,到账检测不出呢

加标量10ug
应该不算低了
我就纳闷了
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6楼2011-10-31 10:39:53
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

检测标准品的时候出峰了
有个很诡异的现象
标准品低浓度时 感觉在主峰旁边有个小小的峰
随着浓度的变大 小峰渐渐没有了
稍后上图
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9楼2011-11-01 12:22:46
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 3106891 at 2011-11-01 16:07:44:
前处理对吗  前处理是关键

前处理是参照SCI文献上的 基本上大部分的文献都是引用的这样的方法 所以我也参照了
但是就是得不到别人的好结果
急死了 不想读下去了 好无助
不要为旧的悲伤浪费新的眼泪
12楼2011-11-01 22:56:18
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 13667638179 at 2011-11-02 14:34:28:
浓度大了前面的小峰估计是被包裹在主峰里了
标准品出峰,样品不出峰,可能是你的样品在哪步变异了。
标准品和样品处理方法不一样,不好判断
能不能把你的样品也做成盐酸盐试试

我也是在想 我的标准品是买的sigma的盐酸盐结晶  样品最终是用煮沸的20mM HCL
复溶的 然后标准品和样品均用衍生试剂衍生化后上液相的
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14楼2011-11-02 18:45:24
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qiuniao

铜虫 (小有名气)

内容已删除
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16楼2011-11-02 22:59:31
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