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酶连的solution1高效连接液可以稀释使用吗?
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xuelian11986
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专业: 环境微生物学
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酶连的solution1高效连接液可以稀释使用吗?
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我用的是PMD19-t载体,它配套的solution1高效连接液不够用了,但是t载体还有很多,这样的情况怎么办,我可以稀释使用solution1吗?
我酶连的体系是solution1 5微升
PCR回收产物 5微升
t载体 0.2微升
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1楼
2011-10-22 11:54:02
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swahonllow
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【答案】应助回帖
宝生物 pMD ®18-T Simple Vector试剂盒 中Solution I 的成分是什么?连接酶和连接bufffer?buffer里面的 具体作用是什么?请教各路大神~~因为接触TA克隆不久,还有很多要学,请多多指教~
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5楼
2014-04-22 13:50:38
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doublehelix
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专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助! 2011-10-22 21:17:16
一般公司提供的连接液作适当稀释应该是可以的,还是做实验试试吧
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2楼
2011-10-22 21:04:43
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xiaoche
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专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★
西瓜(金币+2): Good 2011-10-26 23:21:52
可以的,但是稀释倍数不要太高就可以了。很好奇,你们的solution怎么用这么快?从来都是solution剩下的飘过
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3楼
2011-10-26 21:27:26
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illcf_11
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虫号: 826876
注册: 2009-08-12
性别:
MM
专业: 生物化学
【答案】应助回帖
稀释我还没有做过,个人觉得稍微稀释的,最多效率低一点,还是能连进去的。我觉得你可以缩小连接的体系,普通TA克隆的连接效率很高的,我一般就做5ul的连接体系足够了。我一般也是载体不够用,不存在solutionI不够用的情况,制剂盒中的solutionI用完了,你也可以用别的公司的T4 DNA 连接酶代替,本身solutionI就是连接酶和连接buffer的混合物
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4楼
2011-10-27 10:56:55
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