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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这叫人怎么活呀，阴性对照条带忒丰富了点吧
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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 这叫人怎么活呀，阴性对照条带忒丰富了点吧

RAPD扩增，听从高人指点，做了阴性对照（以水代替模板DNA），居然这么给力，好多带呢

啥米原因啊？要怎么处理啊？我想先把灭菌水换了，还有什么要注意滴
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1楼 2011-10-20 22:01:57
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love_st

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 墨池 at 2011-10-21 12:18:34:
OMG，那你说，buffer，Mg,DNTP，Taq,引物都换新的，然后水也重新灭菌，这样可以试验吗？

水先做一个交叉实验，可以把别人用的没问题的水，你试下，如果有扩增，很有可能水不行，再考虑其它的，不过要考虑下你做的是什么模板，我在扩一些内参基因的时候，阴性对照时常比较容易扩增，我只能通风、紫外、84。还有就是要考虑你试剂来源，引物来源，一些公司合成的引物很可能自身都已经被污染过了，我之前做过一次这样的。
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4楼2011-10-21 12:36:27
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love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

墨池(金币+2): 2011-10-21 12:17:10
阴性对照有出来，要排除的原因很多啊，每一个试剂。。。。
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2楼2011-10-21 10:22:06
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墨池

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love_st at 2011-10-21 10:22:06:
阴性对照有出来，要排除的原因很多啊，每一个试剂。。。。

OMG，那你说，buffer，Mg,DNTP，Taq,引物都换新的，然后水也重新灭菌，这样可以试验吗？
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
3楼2011-10-21 12:18:34
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