24小时热门版块排行榜    

查看: 1246  |  回复: 5
【悬赏金币】回答本帖问题,作者fanger将赠送您 20 个金币

fanger

银虫 (小有名气)

[求助] 求助裂解细胞又不降低酶活

看资料最好是超声波裂解细胞,可是我做的时候在裂解前后均有白色沉淀物,我认为是细胞,而且检测蛋白浓度很小,觉得没裂解好。
用裂解液裂解细胞,可能会对酶活有影响,但不确定对我的是否有影响一,我测的无参考值。
用反复冻融法裂解细胞,看资料效率不高,而且影响酶活。
目前我用的是裂解液裂解细胞,但不确定其实用价值,希望找到另一种可行方法, 本人倾向于超声波裂解方法,但奇怪的是加生理盐水以后的动物细胞(包括癌细胞)均有沉淀,是什么原因呢?还是超声波裂解细胞时加的溶液不是生理盐水而是别的东西?求各位大虾帮忙!急求解答!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

做好自己!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bubble1220

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你有没有测酶活看一下?
我曾经做过实验比较,用的是超声破碎和液氮研磨,都对酶活没有影响
2楼2011-10-19 10:22:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我们用的超声波 结果还好
冷风过心变热
3楼2011-10-19 13:41:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

linyingjia

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

ip   可以测caspase酶活
4楼2011-10-19 19:38:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

demixu

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你的cell density很高的话,加生理盐水肯定很容易沉淀啊,我用超声波一般都是用Tris-Cl buffer来resuspend cell的
5楼2011-10-20 14:42:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lemonwanwan

新虫 (初入文坛)

楼主后来找到合适的裂解细胞的方法没,我之前试过RIPA裂解液和超声破碎,测胞内成分时候均没有效果,现在还在苦恼。。。。
想试一下反复冻融,也不知道会不会有影响
6楼2015-11-12 13:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fanger 的主题更新
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 有两个省级人才帽子跳槽找工作,难度怎么样 +9 akslis2024 2024-12-23 9/450 2024-12-25 13:01 by qsx04152006
[考博] 2025博士招生 +3 生生不息厉害啊 2024-12-23 4/200 2024-12-25 10:18 by 百晓cc
[教师之家] 你们都降薪了吗? +16 红枣葡萄干 2024-12-18 17/850 2024-12-25 10:01 by lide966
[考博] 2025届化工专业博士申请 5+3 Hkeyan 2024-12-23 5/250 2024-12-25 08:47 by highxixi
[硕博家园] 四线城市公办高校无编or二线城市民办高校 +16 joshhartford 2024-12-20 35/1750 2024-12-24 23:35 by ?h語言達蜀黍
[教师之家] 如果评职称不需要国家自然基金,还会有人去申请吗? +6 akslis2024 2024-12-19 6/300 2024-12-24 14:35 by ou0551
[考博] 想找一位年轻的985博导 +9 艾弗森迪尔 2024-12-21 12/600 2024-12-24 14:05 by 六两废铜
[考研] 26考研 +9 青云要冲沪深 2024-12-21 9/450 2024-12-24 11:09 by zjhzclm
[考博] 中山医学院生物信息申博 +4 wcy98117 2024-12-22 4/200 2024-12-24 11:08 by zjhzclm
[有机交流] 3-溴呋喃到甲氧基呋喃 +4 dyl7838 2024-12-20 7/350 2024-12-24 08:49 by 091602
[考博] 定向就业,毕业证学位证由工作单位领取? +5 河西夜郎 2024-12-22 6/300 2024-12-24 08:03 by maolC
[论文投稿] 污染物降解的矿化特性 +9 透明的心sky 2024-12-23 12/600 2024-12-24 00:42 by 透明的心sky
[论文投稿] 请问ICASSP必须要去参会吗? 5+3 火炎焱烤猪 2024-12-21 4/200 2024-12-23 16:39 by bluestork
[论文投稿] 三个手稿 10+5 s爱吃芒果 2024-12-22 9/450 2024-12-23 16:32 by 世界之源
[有机交流] 装柱干法上样 +5 刘松垚 2024-12-20 5/250 2024-12-23 13:14 by 风永不止步
[找工作] 柔引引进博士硕士。 +21 大发财树 2024-12-18 22/1100 2024-12-23 09:32 by Demo呆萌
[考博] 申博的科研计划书怎么写? +6 爱喝风的龙卷茶 2024-12-19 11/550 2024-12-23 07:55 by vincent_hpax
[论文投稿] Required Reviews Completed +9 驴哈哈 2024-12-20 10/500 2024-12-22 20:58 by 凌晨一点393
[教师之家] 今年的科研绩效只奖励Q1了 +12 holypower 2024-12-20 17/850 2024-12-21 16:13 by willbuilder
[教师之家] 删了哦 (EPI+-1)(金币-50) +5 原因在哪里 2024-12-18 6/300 2024-12-19 12:25 by keikofans
信息提示
请填处理意见