24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
汕头大学海洋科学接受调剂
查看: 7032  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

hrjxx

新虫 (小有名气)

[求助] TCA/丙酮沉淀,蛋白为什么不溶呢??

大家好,我用0.2%DTT,10%TCA的丙酮溶液沉淀蛋白后,为什么蛋白就是不溶呢??一直是离心后的那种块状,不能被溶解开啊,大家知道是什么原因吗??我的裂解液成分是:9M尿素,1%DTT,4%CHAPS,0.2%CA,沉淀后干燥12分钟,室温溶解了6个小时候,还是块状,大家指教下啊!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 求索寻觅 at 2011-10-17 18:44:55:
我觉得不要用TCA法,我现在直接用7M尿素,2M硫尿的方法,离心35000g(我们实验室达不到40000g或者100000g)4度离心60min,聚焦电压也可以达到7000v,我觉得应该没什么很大问题。
我现在也在做预实验,我的聚焦没 ...

好啊,多谢了 啊,我随时通报我的提取情况啊
8楼2011-10-17 20:10:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助! 2011-10-16 10:53:05
hrjxx(金币+2): 谢谢啊 ,你们一般干燥多长时间啊 ?? 2011-10-16 16:57:50
干燥时间太长,一般干燥是沉淀为半透明状就可以了
一切开始于结束之后
2楼2011-10-16 07:29:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蕾雷

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励应助! 2011-10-16 10:52:46
hrjxx(金币+2): 谢谢啊,离心转速低了,会不会蛋白沉淀不完全啊 ? 2011-10-16 16:59:36
丙酮沉淀完 离心的转速不要太高  离心的时间不要太长 能把上清去除就行,干燥的时候 注意不要时间很长 另外 你的裂解液 可以放2m 硫脲
3楼2011-10-16 09:06:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hrjxx

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 蕾雷 at 2011-10-16 09:06:24:
丙酮沉淀完 离心的转速不要太高  离心的时间不要太长 能把上清去除就行,干燥的时候 注意不要时间很长 另外 你的裂解液 可以放2m 硫脲

伯乐说明上,推荐我们的是35000G了 ,别的好像都是小于20000G的
4楼2011-10-16 20:00:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404 22408 309分求调剂 +5 lzmk 2026-04-14 5/250 2026-04-14 14:53 by Delta2012
[考研] 297求调剂 +23 ORCHID1 2026-04-10 26/1300 2026-04-14 13:52 by 陈皮皮
[考研] 297,工科调剂?河南农业大学本科 +7 河南农业大学-能 2026-04-14 7/350 2026-04-14 11:48 by lbsjt
[考研] 一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂 5+5 chenny174 2026-04-10 37/1850 2026-04-14 07:39 by Abskk
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 一志愿华工085600 331分 +7 天下ww 2026-04-09 7/350 2026-04-13 09:01 by lhj2009
[考研] 2本,初试303,0860求调剂 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +5 弱水听文 2026-04-09 5/250 2026-04-12 13:16 by shengxi123
[考研] 085404 293求调剂 +9 勇远库爱314 2026-04-08 9/450 2026-04-12 02:24 by 秋豆菜芽
[考研] 267求调剂 +8 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 8/400 2026-04-11 21:42 by cfdbai
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 346,工科求调剂 +3 moser233 2026-04-09 3/150 2026-04-11 10:04 by zhq0425
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 一志愿北理工298英一数二已上岸,感谢各位老师 +14 Reframe 2026-04-10 16/800 2026-04-10 23:07 by caotw2020
[考研] 一志愿中科大070300化学,314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考博] 博士自荐 +7 可可小胖 2026-04-08 7/350 2026-04-10 08:28 by kimhero
[考研] 085601初试330分找调剂 +10 流心奶黄包l 2026-04-09 10/500 2026-04-10 08:14 by Sammy2
[考研] 085404,285分求调剂 +12 薇薇考研 2026-04-07 14/700 2026-04-09 23:10 by parmtree
[考研] 本科211 工科085400 280分求调剂 可跨专业 +3 LZH(等待调剂中 2026-04-09 3/150 2026-04-09 21:29 by wutongshun
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见