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有柱残留怎么解决?
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zhongguo_2
金虫
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[交流]
有柱残留怎么解决?
请教各位同行,C18色谱柱有柱残留怎么解决?我能想到的有两点:1.将柱子颠倒过来冲;2.再生。但是我自己都没有亲自试过,不知道效果怎么样?希望大家能互相交流下经验,这应该是很常见的问题。
还有,针对C18柱,哪类化学物质容易导致残留?
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2011-10-14 12:51:19
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自己先顶下,大家踊跃发言哈!
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2011-10-14 12:51:47
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zhongguo_2(金币+3): 2011-12-09 13:40:23
要看残留的严重程度,一般的话就用10%甲醇小流速冲1h,在永春甲醇或乙腈冲1h;要是很严重的话,柱子压力很大,就需要反冲了
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2011-10-14 13:30:02
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zhongguo_2(金币+2): 2011-12-09 13:40:43
生物样品中组成很复杂,很容易就残留了。比如一些小分子蛋白,多肽什么的。还有就是用缓冲盐时,如果流动相中有机相比例忽然变得很高,就容易使盐析出,堵在色谱柱里。
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2011-10-15 13:58:25
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zhongguo_2
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要看残留的严重程度,一般的话就用10%甲醇小流速冲1h,在永春甲醇或乙腈冲1h;要是很严重的话,柱子压力很大,就需要反冲了
我平时都是这样洗柱子的,不过每步只冲半个小时。在做样时,空针里杂质峰很高,而且做样时也一样有,不知道怎么解决!
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5楼
2011-10-17 10:55:13
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ntzsl
at 2011-10-15 13:58:25:
生物样品中组成很复杂,很容易就残留了。比如一些小分子蛋白,多肽什么的。还有就是用缓冲盐时,如果流动相中有机相比例忽然变得很高,就容易使盐析出,堵在色谱柱里。
我是做化学分析的,但是我们这边也有生物分析,经常会听到他们说“柱子没怎么用呢,柱压已经比之前高了好多”。还有用缓冲盐时有机相的比例不能一下子过高,如果这种情况导致色谱柱堵了的话,用95%甲醇水在低流速下冲洗一段时间,然后再提高到正常流速就可。我说的主要是残留在柱子上的杂质不好除。
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6楼
2011-10-17 11:03:47
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zhongguo_2(金币+5): 2011-12-09 13:41:31
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zhongguo_2
at 2011-10-17 10:55:13:
我平时都是这样洗柱子的,不过每步只冲半个小时。在做样时,空针里杂质峰很高,而且做样时也一样有,不知道怎么解决!
我们也遇到过这种情况,流动相里加了离子对缓冲剂,还有一些加缓冲盐的,这样空白有时候也出好几个峰,我个人是这样想的,如果不干扰其它杂质或主峰的测定应该是可以的,如果干扰需要微调色谱条件了
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7楼
2011-10-17 15:53:29
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