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小皇帝余同学

银虫 (小有名气)

[求助] 多糖超滤方面的问题,嘿嘿~~

小弟做多糖,DEAE盐洗后HPLC跑出两个峰,一个分子量200多万刀,另一个大约几十万刀,第一步先用1000D的膜超滤除盐,接下来应该用多少的滤膜超滤样品把他们分离出来比较合适?Sample Text
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mssj300130

铜虫 (小有名气)

首先你的大小一个是2M一个是200K,200K的很难通过超滤去除的,即使是300K的膜包;另外你在上柱前的确应该考虑乙醇的分级沉淀,或者季铵盐等等,方法的话可以差一些多糖方面的文献,还有就是你除盐用1K的速度岂不是很慢很慢,用G-25 medium脱盐的话比较好应该,当然这样看你有多少样品了,样品比较多的话用大一点的膜包100K除盐可能都没问题的,上柱条件可以摸索一下,这两个都是酸性多糖,如果采用不同的盐浓度基本上会有一个分子量上的对应,这个跟做多糖疫苗的纯化比较相似
还有就是为什么不加分。。。
8楼2012-04-10 14:42:42
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cxhjm

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小皇帝余同学(金币+1): 2011-10-11 14:14:49
引用回帖:
1楼: Originally posted by 小皇帝余同学 at 2011-10-10 21:02:22:
小弟做多糖,DEAE盐洗后HPLC跑出两个峰,一个分子量200多万刀,另一个大约几十万刀,第一步先用1000D的膜超滤除盐,接下来应该用多少的滤膜超滤样品把他们分离出来比较合适?Sample Text

不同酒精浓度之前试过没,另一个到底是多少十万da
2楼2011-10-11 10:43:15
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小皇帝余同学

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cxhjm at 2011-10-11 10:43:15:
不同酒精浓度之前试过没,另一个到底是多少十万da

另一个大约20万左右(我是用别人的标曲算得,只是估算),不同酒精浓度是指哪一步?
3楼2011-10-11 14:11:26
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cxhjm

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


kanavaro11(金币+1): 积极!欢迎常来! 2011-10-12 20:19:13
小皇帝余同学(金币+4): 2011-11-01 09:34:56
不是先酒精极分,在上柱子的吗?分子量大的不是先析出来,小的后一点析出来?
4楼2011-10-11 14:20:59
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