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whovering

金虫 (小有名气)

[求助] 求助关于MTT数据分析 已有1人参与

请教做过MTT的虫友,做MTT时用酶标仪测吸光值,有的说用490nm,有的说用570nm,有区别吗? 空白对照,最后比色以空白调零,怎么调零?是酶标仪自动调零吗?加DMSO前要小心吸弃孔内培养上清液,请问空白对照的也要吸弃吗?
最后一个问题,酶标仪测得的数据怎么分析,算IC50
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shibingw

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
onewinder(金币+3): 欢迎提供帮助 2011-10-25 18:07:32
用酶标仪检测每孔的吸收值。将测得的OD490nm值代入如下公式:细胞生存率=(OD病毒感染孔-OD调零孔)/(OD对照孔-OD调零孔)×100%,进而计算细胞生存率。以浓度为横轴,细胞生存率为纵轴绘制细胞生长活力曲线。IC50很多做图软件都有,excel也有
2楼2011-10-25 15:22:34
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dx123

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
onewinder(金币+3): 感谢提供意见 2011-10-26 18:57:10
MTT时用酶标仪测吸光值的OD值是一个范围,我做的时候开始用630nm,后来感觉总是不对,后来改用490nm检测,我觉得和你自己的细胞类型有关。我做的时候都是读取的原始数据,在按照公式就行计算的。DMSO前要小心吸弃孔内培养上清液,所有的组别是一样的处理方法。
科研无止境
3楼2011-10-26 13:39:41
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dyhwxh

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

方法详见文献

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  • 附件 1 : 小议在MTT法测细胞增殖抑制率中IC_50_的计算方法_赵斌.caj
  • 2015-04-11 23:32:21, 120.54 K
4楼2015-04-11 23:33:17
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