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huzhihong-

新虫 (小有名气)


[交流] PCR电泳,加样孔很亮,但目的条带却很淡,不知道怎么回事? 已有18人参与

如题,以胶回收产物为模板,进行第二轮PCR,做了三次,每次都是点样孔很亮,目的条带很淡,不知道为什么?请高手赐教!
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koojames23

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by huzhihong- at 2011-10-03 16:58:03:
胶回收产物才1300kb,应该没有超螺旋吧

1300kb?这么大?
还是1300bp?
如果是1300kb,那肯定是你胶回收的产物太浓了
红魔
12楼2011-10-05 10:16:00
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利! 2011-10-07 13:51:32
切胶的时候没有切到别的条带吗?有没有阴性对照,可能PCR体系有污染
莫负家国与红颜
2楼2011-10-02 22:44:23
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粥香可爱

铜虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
胶回收的产物没有超螺旋吗?亮的带在后面,会不会是超螺旋的质粒跑不动?
莫负家国与红颜
3楼2011-10-02 23:01:38
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chenguestc

木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
adslye(金币+2): 鼓励交流~祝顺利! 2011-10-07 13:51:40
你的MARKER是对的,说明胶的问题不是很大(但也可能是影响因素)。
可能的原因是:(1)DNA不纯,里面蛋白质过多。
              (2)梳子非常不干净,有杂质在点样孔里
              (3)胶的浓度(过大或过小)不适合你的PCR产物

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2011-10-03 09:35:30
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