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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 筛菌，摇瓶菌体有生长，涂板没有菌落，为什么
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tuzichen123

金虫 (小有名气)

[求助] 筛菌，摇瓶菌体有生长，涂板没有菌落，为什么

我在筛选一种降解某种有机物的菌，以该有机物为单一碳源，摇瓶液体培养基培养3-4天可以变浑浊，但是用这个浑浊的菌液在相同成分的固体培养基上涂板过夜放置时却没有菌落长出来。我觉得可能有以下几个原因：
1.培养时间不够长;
2.作为碳源的有机物是水不溶的，为了确保所筛出得菌是降解该有机物的，我并未加有机溶剂助溶，是否是由于该有机物溶解不均匀而导致无菌落生成

另外，我想，既然在菌液是在我的有机物为单一碳源的条件上生长出来的，那么，在涂板的时候采用营养较为丰富的培养基（如含有其他碳源）分离菌体是否可以达到相同的效果呢？

请各位大侠帮帮忙，小女子不慎感激！
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1楼 2011-09-26 09:41:11
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-26 17:48:18
tuzichen123(金币+2): 2011-09-27 09:26:44
你可以使用液体培养基的组分，用半固体培养基穿刺培养，这样有利于分离菌体。不建议使用丰富培养基分离，容易产生杂菌污染
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
2楼2011-09-26 17:11:34
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qinyongfeng

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

tuzichen123(金币+2): 2011-09-27 09:26:34
摇瓶液体培养时用3—4天才变浑浊，在平板上过夜，时间有点短。
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3楼2011-09-26 20:25:07
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tuzichen123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-09-26 17:11:34:
你可以使用液体培养基的组分，用半固体培养基穿刺培养，这样有利于分离菌体。不建议使用丰富培养基分离，容易产生杂菌污染

恩啊，谢谢。但是半固体穿刺不是更难挑克隆吗?为什么会有利于分离呢？
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4楼2011-09-27 09:25:57
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tuzichen123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by qinyongfeng at 2011-09-26 20:25:07:
摇瓶液体培养时用3—4天才变浑浊，在平板上过夜，时间有点短。

是的，我多养了一天，在板上可以看见微小的菌落了
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5楼2011-09-27 09:27:20
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-09-27 10:32:15
tuzichen123(金币+1): 2011-09-27 10:45:06
引用回帖:
4楼: Originally posted by tuzichen123 at 2011-09-27 09:25:57:
恩啊，谢谢。但是半固体穿刺不是更难挑克隆吗?为什么会有利于分离呢？

从肉眼可见的菌苔再次挑出菌体，在丰富培养基上划线分离。这样利于排除杂菌干扰。
否则，直接用富营养培养基，易于染菌。

你从半固体穿刺的菌苔颜色，粘度的基本特性，识别出你需要的菌体大概特征
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
6楼2011-09-27 10:06:25
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tuzichen123

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by zhymhbu at 2011-09-27 10:06:25:
从肉眼可见的菌苔再次挑出菌体，在丰富培养基上划线分离。这样利于排除杂菌干扰。
否则，直接用富营养培养基，易于染菌。

你从半固体穿刺的菌苔颜色，粘度的基本特性，识别出你需要的菌体大概特征

哦，原来是这个样子，灰常感谢~~
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7楼2011-09-27 10:45:48
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