24小时热门版块排行榜    

查看: 3253  |  回复: 7

masihong

金虫 (小有名气)

[求助] 细菌OD值的测定

请教各位,细菌的OD值到底怎么测啊?我现在想扫一下全波长,先确定一下细菌在哪个波长下测吸光度,可是为什么没有出现特征吸收峰呢?还是就按文献上的测OD600?我想用水做参比,然后将菌体离心洗涤,这样处理了三次,然后将菌体稀释十倍,但是这样测出的跟基线没什么区别,是不是在处理菌体的时候把细菌给稀释没了啊?因为我是外行,现在刚接触生物这块,希望得到大家的耐心指导,谢谢!在用营养液做参比的时候,测出在246nm波长下出了一个峰,但是不确定以后是不是就在这个波长下测,并且用营养液作参比感觉太浪费了。
回复此楼
笑天涯
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


masihong(金币+5): 2011-09-25 17:53:01
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-09-25 20:11:15
如果你是直接测液体培养基摇的的菌的话那就OD600,用没接菌的无菌培养基作对照,如果你是离心后用其他液体重悬的话那就用空白的悬浮液作对照
你做的246nm可能是培养基的吸收峰吧,不是菌的吸收峰,正经细菌浓度的波长就是OD600
显微镜下的世界很精彩!
2楼2011-09-24 22:04:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
masihong(金币+5): 2011-09-25 17:52:56
rainwander(金币+2): 鼓励交流 2011-09-25 20:11:32
WLS是正确的,但是你应该选择不同稀释度,都做WLS,然后看看那个值是能够和菌体浓度相关的。
有的时候,特征吸收峰和菌体生理状态有关,如色素组成或者某种代谢物的产生,而不是同菌体相关的。
如果是单细胞的菌体,OD600的吸收一般都是可以的,除非你的材料在这个地方有特异性吸收。
致良知
3楼2011-09-24 22:33:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

masihong

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-09-24 22:04:00:
如果你是直接测液体培养基摇的的菌的话那就OD600,用没接菌的无菌培养基作对照,如果你是离心后用其他液体重悬的话那就用空白的悬浮液作对照
你做的246nm可能是培养基的吸收峰吧,不是菌的吸收峰,正经细菌浓度的 ...

那我就在600波长下测了?关键我想看看600到底有没有峰,但是做了几次样总是没出峰,是不是不用管出峰不出峰,直接测就可以啊?
笑天涯
4楼2011-09-26 09:14:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

masihong

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by quiller2000 at 2011-09-24 22:33:23:
WLS是正确的,但是你应该选择不同稀释度,都做WLS,然后看看那个值是能够和菌体浓度相关的。
有的时候,特征吸收峰和菌体生理状态有关,如色素组成或者某种代谢物的产生,而不是同菌体相关的。
如果是单细胞的菌 ...

关键我一开始是离心收集的菌体,但是收集到的太少了,然后分别稀释了10倍和100倍,测出来的吸光度非常小,并且也没有找到特征吸收峰,怎么办呢?我还是直接测OD600,不扫全波长得到最大吸收峰了?
笑天涯
5楼2011-09-26 09:20:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

quiller2000

木虫 (著名写手)

OK,你可以分时间取样,比如接种后1,2,4,6,8,10h取样,每次做一次WLS,这样一比较就可以了
致良知
6楼2011-09-26 12:59:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouke123

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

7楼2012-02-21 14:45:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小子的饭桶

金虫 (正式写手)

a wave in the ocean,the lig

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhouke123 at 2012-02-21 14:45:16:
你好,我想问一下,就是测菌液密度的时候测OD600,用培养基做空白对照,菌液稀释的话,对照需要稀释吗??

如果你用培养基稀释菌液的话,用培养基稀释培养基就没必要了吧;如果不是用培养基稀释,那对照肯定也要做相应的处理,否者对照就没太大的意义了吧
8楼2012-03-10 21:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 masihong 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 能否申诉? +6 echo8914667 2026-08-30 7/350 2026-08-31 08:41 by kingkocxr
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 为什么到现在没收到通知? +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +6 gdd2018 2026-08-28 11/550 2026-08-30 08:58 by 超级无敌华子
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +15 晴天加油 2026-08-26 16/800 2026-08-29 18:28 by symmetry
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗? +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
请填处理意见