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zhymhbu木虫 (正式写手)
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[求助]
芽孢杆菌的表征，SEM STM 环境扫描电镜
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自己分离到一个芽孢杆菌，准备一个分离菌种和发酵特性的文章。 想要用电镜表征一下菌体，包括营养体和芽孢体 用SEM很多，但是需要固定什么的 听说环境扫描电镜不需要处理，更适合微生物表征 有做过相关分析的朋友吧，期待指教。做环扫电镜，对微生物样品有什么要求，需要怎么处理样品 |
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 电镜表征 | SEM资料汇编 |
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【答案】应助回帖
★ ★ ★
zhymhbu(金币+1): 好专业的回答。谢谢了 2011-09-27 10:08:42
rainwander(金币+3, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:34:52
zhymhbu(金币+1): 好专业的回答。谢谢了 2011-09-27 10:08:42
rainwander(金币+3, MicEPI+1): 鼓励交流 2011-09-27 10:34:52
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正常情况下，高真空模式图像质量和分辨率都要好。 微生物细胞等含水量大，不耐真空，真空脱水变形严重，在高真空或者低真空常规模式下观察，都需要按照常规方法制样，尽可能的保持细胞原装到干燥为止，一般相对新鲜的细胞或者微生物原貌，一般会有大约10-15%的收缩，有些芽孢类收缩率高达60%，。就像枣，鲜枣和干枣外形有些不一样，但我们都还知道那是枣，些许收缩，一般应该不会影响识别，估计大家也都认可。 常规或者换扫的差别主要体现在，是否追求活鲜的原貌。 在追求活鲜微小生命体原貌的道路上，冷冻电镜技术走在前面，一种使用常规高真空模式观察新鲜微生物或者细胞原貌。在电镜样品室安装专门的冷冻样品台，在样品室内首先进行冷冻，然后切割露出组织或者细胞，在电镜样品室内喷金或者不喷金（组织体液具有一定导电性）直接观察形貌。冷冻电子显微术实现了高分辨观察微小生物体新鲜原貌，但的我知道的国内某单位招标的最贵冷冻台价格大约70万人民币，代价很高。 无论如何冷冻电镜技术在操作技术上上还是比较难的，而且要获得好的效果，代价高昂， 因此，生命科学显微工作者发明了环境扫描电镜技术，并进行常规扫描电镜的改造推广， 这个技术后来卖给了飞利浦，现在的FEI环境扫描电镜。可以观察新鲜的微小生命体的原貌，当然设置好条件，你也可以动态观察，细胞水分挥发，收缩变形的过程。 从指标上看环境扫描电镜分辨率也非常高，不过国内做环扫的大多水平不高，这个和使用机制有关系，大多数情况下得不到好的结果，也许实验室的操作人员会建议你使用环境扫描电镜的常规模式。 |
10楼2011-09-27 01:14:56
bohr86
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3楼2011-09-25 13:21:08
zhymhbu
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4楼2011-09-26 15:06:36
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5楼2011-09-26 15:08:45
5