应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求高手告知：如何测定特定蛋白的浓度，目的蛋白占总蛋白百分比？
61/1返回列表
查看: 2691  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

godnoi

金虫 (小有名气)

[求助] 求高手告知：如何测定特定蛋白的浓度，目的蛋白占总蛋白百分比？

各位大侠，本人现在做的课题是一个蛋白的酵母表达，目前蛋白已经表达出来了，但不知如何测定目的蛋白浓度。我的蛋白大小为15KD，没有标签，不能纯化。听说可以直接测目的蛋白占总蛋白的百分比，但不知具体怎么操作。特在此求教，不甚感激！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-09-22 20:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-23 12:38:17
godnoi(金币+1): ★有帮助 2011-12-22 10:20:29
godnoi(金币+1): ★有帮助 2012-02-28 18:13:09
古老的方法是进行估算，借助电泳图像。总蛋白容易得到，上样量也知道，可以估算，通过一个已知蛋白做对照。若是有钱可以买抗体，用磁珠分离目的蛋白，就可以确定了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-09-22 23:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1514132

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-23 12:38:26
跑蛋白样品的SDS-PAGE电泳，留取凝胶做蛋白薄层扫描，就可以得到目的蛋白占菌体总蛋白的百分含量。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-09-23 07:49:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

casey200788

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
酵母表达的蛋白杂蛋白很少的。如果不是很精确的要求，一般SDS-PAGE估算，借助电泳图像。总蛋白容易得到，上样量也知道，可以与蛋白质MARKER一起估算，或像楼上说的，薄层扫描也可以。
赞一下 回复此楼
4楼2011-12-10 17:17:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinlv

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
SDS-PAGE电泳图像直接测目的蛋白占总蛋白的百分比
酵母表达的蛋白杂蛋白很少的，如要精确，可过分子筛层析柱，按峰图确定
赞一下 回复此楼
5楼2012-02-28 17:41:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesexue

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by casey200788 at 2011-12-10 17:17:29
酵母表达的蛋白杂蛋白很少的。如果不是很精确的要求，一般SDS-PAGE估算，借助电泳图像。总蛋白容易得到，上样量也知道，可以与蛋白质MARKER一起估算，或像楼上说的，薄层扫描也可以。

请问一下薄层扫描需要什么仪器啊
赞一下 回复此楼
6楼2013-08-15 10:38:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 godnoi 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 04:33 by Ie9AyIAvGbvs
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LIbGuocjEEYw 2026-08-26 4/200 2026-08-27 02:01 by Ie9AyIAvGbvs
[基金申请] 我不理解！ +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 怎么查啊 +5 huang1991js 2026-08-26 5/250 2026-08-26 16:09 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +4 叶九微 2026-08-26 4/200 2026-08-26 10:52 by xiacongxu
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽：我怎么摊上了这么个极品研究生！ +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办？ +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭