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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » HPLC中流动相的pH问题？
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] HPLC中流动相的pH问题？

弱弱地问，HPLC中，流动相若用磷酸调pH值至4，调过了，pH到3了，怎么办？用NaOH滴加中和吗？一般多少浓度的NaOH？
HPLC实验中，流动相的pH影响大吗？
流动相中加入乙酸钠，用冰醋酸调pH；而流动相中加入磷酸二氢钾，用磷酸调pH，是要缓冲盐和对应的酸一起吗？若流动相中加入磷酸盐，是不是只能用磷酸调pH，不能用盐酸、冰醋酸？
恳请高手赐教，感激不尽！
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去做自己想做的
1楼 2011-09-20 00:07:49
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maxmaster

银虫 (初入文坛)
★
karl2100(金币+1): 谢谢参与讨论！ 2011-10-05 00:06:30
引用回帖:
21楼: Originally posted by yilishanshan at 2011-09-27 19:43:44:
不错的建议，用稀磷酸调，呵呵，我用的是浓磷酸，不小心就调过了！
朋友，可否解释下为什么NaOH会损伤柱子、密封圈和宝石柱呢？

主要是缓冲盐体系，如果冲洗不干净，就会形成晶体析出，特别是用的久的色谱仪，三乙胺和醋酸都可以做扫尾剂，但是最好和缓冲体系相似 ，我的观点。
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29楼2011-10-02 07:49:09
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查看全部 42 个回答

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
jiangchunyong(金币+2): 谢谢应助!欢迎常来！ 2011-09-20 08:36:49
yilishanshan(金币+5): 谢谢，若P 2011-09-27 19:33:15
pH影响的大小，主要取决于样品酸碱性。样品中性，基本没啥影响，样品酸碱性，对保留时间影响较大，流动相pH在样品pKa正负1范围内变化，保留时间变化最大。

酸盐以对应的酸调pH，能形成较稳定的pH缓冲体系，若流动相有蒸发沉淀等变化，不至于流动相pH变化太大而造成保留时间发生变化。当然，以磷酸盐为例，若以盐酸、醋酸等调pH，亦未尝不可。

返调pH 的问题。理论上，是可以的。引入少量的盐，一般不会对峰型等造成加大的影响。浓度，随意。
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守候在风中的宁静。
2楼2011-09-20 08:26:26
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xiaoxiazizx

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
novus(金币+1): 谢谢交流，欢迎常来药学版！ 2011-09-20 18:58:27
最好重新另配缓冲液，因为流动相最好不要含有过多盐的成分，对柱子损伤很大。而且柱子的pH使用范围是一定的。流动相中加入磷酸盐，最好用磷酸调啊，否则引入其他的杂质
赞一下(2人) 回复此楼
刻意去找的东西，往往是找不到的。天下万物的来和去，都有他的时间。
3楼2011-09-20 09:51:29
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lxh729

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢应助!欢迎常来！ 2011-09-20 16:52:20
HPLC中，流动相若用磷酸调pH值至4，调过了，pH到3，若是对浓度要求不是很严格，且现在的浓度还不是很大，可用磷酸氢二钾或磷酸氢二钠调，一般不用氢氧化钠来调，最好让水相形成缓冲盐。
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4楼2011-09-20 11:22:00
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