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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

[求助] HPLC中流动相的pH问题?

弱弱地问,HPLC中,流动相若用磷酸调pH值至4,调过了,pH到3了,怎么办?用NaOH滴加中和吗?一般多少浓度的NaOH?
HPLC实验中,流动相的pH影响大吗?
流动相中加入乙酸钠,用冰醋酸调pH;而流动相中加入磷酸二氢钾,用磷酸调pH,是要缓冲盐和对应的酸一起吗?若流动相中加入磷酸盐,是不是只能用磷酸调pH,不能用盐酸、冰醋酸?
恳请高手赐教,感激不尽!
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

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2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2011-09-20 08:26:26:
pH影响的大小,主要取决于样品酸碱性。样品中性,基本没啥影响,样品酸碱性,对保留时间影响较大,流动相pH在样品pKa正负1范围内变化,保留时间变化最大。

酸盐以对应的酸调pH,能形成较稳定的pH缓冲体系,若流 ...

若pH主要是影响保留时间,那所用流动相pH不是标准规定的值,但在柱子能承受的范围内,对照和样品用同一流动相,保留时间变了,有什么关系呢?
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19楼2011-09-27 19:38:10
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

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6?: Originally posted by ???????С?? at 2011-09-20 22:01:33:
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20楼2011-09-27 19:40:15
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yilishanshan

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7楼: Originally posted by maxmaster at 2011-09-21 08:11:33:
重配就是了,可以用希磷酸调吗。用氢氧化钠回调不好,毁柱子,还会磨损泵头密封圈。划伤宝石柱。其实最好不要用缓冲盐体系 。用也要慎重。

不错的建议,用稀磷酸调,呵呵,我用的是浓磷酸,不小心就调过了!
朋友,可否解释下为什么NaOH会损伤柱子、密封圈和宝石柱呢?
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21楼2011-09-27 19:43:44
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yilishanshan

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8楼: Originally posted by missiny at 2011-09-21 09:49:52:
我也做过流动相要调PH的,一般来说,调PH说明你的物质对PH还是相对敏感的,我建议你可以试试用三乙胺调回来,一方面可以调正PH,另一方面,你的峰也减少了拖尾的现象发生。
你最好选用相应的盐调PH。

三乙胺,这么好用呀!记住了,以后试试,谢谢指点!
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22楼2011-09-27 19:45:15
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yilishanshan

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9楼: Originally posted by zghnlpf at 2011-09-21 10:19:16:
分情况
1、如果是已有方法(包括已有标准及已有明确文献),则应严格按标准方法操作,随意改动是不可取的。尤其不能加入原系统注明成分之外的其他成分。其中如果是文献的方法,建议完整重现后再尝试优化。
2、如 ...

很专业,谢谢!
貌似确实不能随便更改,引入没有的杂质!
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23楼2011-09-27 19:47:25
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yilishanshan

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大星星

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16楼: Originally posted by News at 2011-09-23 16:23:19:
流动相之所以选择磷酸盐(钾盐、钠盐)缓冲体系,是因为磷酸盐缓冲液可以提供稳定的pH环境,利于分离。再者钾离子、钠离子皆有饱和柱子的活性中心,避免分析物质与活性中心结合,造成峰拖尾,变宽。其中钾离子的作 ...

很有道理,学习了,谢谢赐教!
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24楼2011-09-27 19:51:20
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yilishanshan

木虫 (正式写手)

大星星

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25?: Originally posted by ???????С?? at 2011-09-27 20:05:06:
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26楼2011-09-27 20:13:01
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