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木左左

银虫 (正式写手)

[求助] 请教DNA提取的实用的方法

小弟,求DNA提取的技术,植物DNA提取,我想提得纯度好,而且不要降解,最近做的老是降解,跑不出带子,恳请大家赐教,大家的经验,自己发明的新的方法等,谢谢大家了.....
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-09-17 13:01:27
植物的哪个部分提取?基本上用液氮法破碎细胞,然后再用相应的试剂盒提取。
2楼2011-09-17 09:15:04
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木左左

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2011-09-17 09:15:04:
植物的哪个部分提取?基本上用液氮法破碎细胞,然后再用相应的试剂盒提取。

试剂盒太贵了,叶片核DNA总DNA
3楼2011-09-17 23:35:32
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木左左

银虫 (正式写手)

置顶啊 啊啊 啊
4楼2011-09-20 01:12:52
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aga0110125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 感谢推荐 2011-09-21 10:11:47
经典的CTAB法就好了,很好用,想纯度好,最后一步把DNA挑出来,无水乙醇洗涤后,干燥或溶解冷冻保存
5楼2011-09-20 13:48:02
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江苏虞游

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 鼓励应助 2011-09-21 10:12:15
CTAB,液氮冷冻,研磨……步骤和楼上的一样
6楼2011-09-20 21:17:02
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betyyang

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 欢迎常来 2011-09-21 10:12:03
CTAB+液氮得到的效果最好;如果目的是常规PCR,即使仅用研磨棒捣碎叶片也能得到条带整齐的DNA
7楼2011-09-21 09:19:35
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xiazhiwuxie

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该好提的,加点液氮黏膜一下,我都是SDS裂解的,很容易提出来,最后溶解的时候用TE缓冲液,量会有所提高。
8楼2012-02-29 16:38:53
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sunwei57

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
经典的CTAB法就好了,氯仿抽提后直接加2倍无水乙醇沉淀
9楼2012-03-18 21:59:26
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青梅煮酒17

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

QIAamp ®DNA Stool Handbook 这个试剂盒价格较贵,但是所得样品纯度较高。本人用于宏基因组DNA的提取,构建Fosmid文库,可行。相较于在传统CTAB法基础上所做到改良,得到的DNA量少了但是质量较高。
10楼2012-08-07 23:09:52
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