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cloudy123

禁虫 (小有名气)

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11楼2012-08-08 10:40:16
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cloudy123

禁虫 (小有名气)

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12楼2012-08-08 10:59:51
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幽幽深谷竹

金虫 (著名写手)

骨子里是文科男的理科男

【答案】应助回帖

其实方法大家都知道的,关键看你是否熟练,仪器、器皿、试剂等别污染了,材料选取也很关键啊!
我就是我IamwhatIam
13楼2012-08-21 11:32:00
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bioleo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

CTAB不二之选。液氮最好有,没有可以用石英砂代替,冰上研磨。记得加DTT或2-ME。
14楼2012-08-22 14:37:18
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
木左左: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-25 14:36:50
按照常规步骤提取即可。
加入提取液后60-65度水浴,没有问题,如果愿意可以在提取液里加入RNA酶,否则最后一步加入处理RNA你的DNA里会有RNA酶哈。
加入醋酸甲也没有问题。
问题是加入氯仿异戊醇后,尽量不要剧烈混匀(其实很多人是这么做的)尤其是最后几分钟的剧烈混匀很容易把从组蛋白上分离下的DNA弄碎,轻轻多混匀几分钟就行。
离心后,吸上清不要过多,不用吸的太干净(不要贪婪,因为中间层有蛋白等杂质)。
加入异丙醇沉淀DNA混匀时也不要剧烈,酒精洗涤液没有问题。其他步骤没有问题哈。
15楼2012-08-22 22:27:02
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