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木左左

银虫 (正式写手)

[求助] 请教DNA提取的实用的方法

小弟,求DNA提取的技术,植物DNA提取,我想提得纯度好,而且不要降解,最近做的老是降解,跑不出带子,恳请大家赐教,大家的经验,自己发明的新的方法等,谢谢大家了.....
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chenguestc

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
木左左: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-25 14:36:50
按照常规步骤提取即可。
加入提取液后60-65度水浴,没有问题,如果愿意可以在提取液里加入RNA酶,否则最后一步加入处理RNA你的DNA里会有RNA酶哈。
加入醋酸甲也没有问题。
问题是加入氯仿异戊醇后,尽量不要剧烈混匀(其实很多人是这么做的)尤其是最后几分钟的剧烈混匀很容易把从组蛋白上分离下的DNA弄碎,轻轻多混匀几分钟就行。
离心后,吸上清不要过多,不用吸的太干净(不要贪婪,因为中间层有蛋白等杂质)。
加入异丙醇沉淀DNA混匀时也不要剧烈,酒精洗涤液没有问题。其他步骤没有问题哈。
15楼2012-08-22 22:27:02
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 感谢交流 2011-09-17 13:01:27
植物的哪个部分提取?基本上用液氮法破碎细胞,然后再用相应的试剂盒提取。
2楼2011-09-17 09:15:04
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木左左

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2011-09-17 09:15:04:
植物的哪个部分提取?基本上用液氮法破碎细胞,然后再用相应的试剂盒提取。

试剂盒太贵了,叶片核DNA总DNA
3楼2011-09-17 23:35:32
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aga0110125

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 感谢推荐 2011-09-21 10:11:47
经典的CTAB法就好了,很好用,想纯度好,最后一步把DNA挑出来,无水乙醇洗涤后,干燥或溶解冷冻保存
5楼2011-09-20 13:48:02
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