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木左左

银虫 (正式写手)

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专业: 基因表达调控与表观遗传学

[求助] 请教DNA提取的实用的方法

小弟，求DNA提取的技术，植物DNA提取，我想提得纯度好，而且不要降解，最近做的老是降解，跑不出带子，恳请大家赐教，大家的经验，自己发明的新的方法等，谢谢大家了.....

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1楼2011-09-16 22:50:51

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chenguestc

木虫 (职业作家)

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专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

★ ★
木左左: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-08-25 14:36:50

按照常规步骤提取即可。
加入提取液后60-65度水浴，没有问题，如果愿意可以在提取液里加入RNA酶，否则最后一步加入处理RNA你的DNA里会有RNA酶哈。
加入醋酸甲也没有问题。
问题是加入氯仿异戊醇后，尽量不要剧烈混匀（其实很多人是这么做的）尤其是最后几分钟的剧烈混匀很容易把从组蛋白上分离下的DNA弄碎，轻轻多混匀几分钟就行。
离心后，吸上清不要过多，不用吸的太干净（不要贪婪，因为中间层有蛋白等杂质）。
加入异丙醇沉淀DNA混匀时也不要剧烈，酒精洗涤液没有问题。其他步骤没有问题哈。