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xiaoqiang100铁虫 (小有名气)
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ELISA测抗体效价的准确性问题
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| 我用ELISA夹心法测抗体效价,底物是蛋白,一抗是我们要测的抗体,二抗是山羊抗兔的HRP标记的,显色物为OPD。但是我感觉,OPD反应的时间越长,OPD显色就越深,O.D值就越高,这样我们用软件分析得出的抗体的效价就不一样。打个比方说:前面所有的条件完全相同,在显色这一步,我有的显色5分钟,有的显色10分钟。因为显色10分钟的O.D值比五分钟大,那么我算出来的同一种抗体的效价就会不同。这个问题该如何解决呢?另外,我们的抗体还没有商业化抗体,所以无法利用现有的商业抗体进行校准。 |
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