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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 串联重复克隆的构建
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 串联重复克隆的构建

我想要串联表达一个有23个氨基酸的多肽，共69个碱基。如何做6串重复的？假设我是要接在某基因（用A表示）的后面，串联的（用B表示）。
是合成一段B，然后与A做加端PCR？还是做6xB再与A重复末端PCR？
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1楼 2011-09-05 13:45:51
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 2011-09-05 18:41:45
sayfxxk2u(金币+3): 2011-09-13 11:58:20
做6xB再与A重复末端PCR，成功几率大点。
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2楼2011-09-05 13:55:11
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-09-05 13:55:11:
做6xB再与A重复末端PCR，成功几率大点。

嗯，那6XB的，在做PCR的时候是怎么做？直接合成，还是加端，B+B=2B，2B+B=3B，这样加，那条带不是很多？
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3楼2011-09-05 14:12:02
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wangnengqiang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 欢迎应助 2011-09-08 22:15:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-05 14:12:02:
嗯，那6XB的，在做PCR的时候是怎么做？直接合成，还是加端，B+B=2B，2B+B=3B，这样加，那条带不是很多？

直接合成6B，也就三百多碱基对，不贵的，自己一个一个加上去太麻烦了，耗费的试剂费也不少的。
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4楼2011-09-05 16:44:45
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangnengqiang at 2011-09-05 16:44:45:
直接合成6B，也就三百多碱基对，不贵的，自己一个一个加上去太麻烦了，耗费的试剂费也不少的。

一个一个加上，要做一个一串的，还要做个6串的，一串的还是要做，所以，麻烦是麻烦点，没有办法。。
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5楼2011-09-08 19:39:51
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)
西瓜: 能不能分享下？哈哈~恭喜了哈！ 2011-09-08 22:15:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangnengqiang at 2011-09-05 16:44:45:
直接合成6B，也就三百多碱基对，不贵的，自己一个一个加上去太麻烦了，耗费的试剂费也不少的。

我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。
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» 本帖已获得的红花（最新10朵）

lulushuo
6楼2011-09-08 19:44:00
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玄小癫

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-08 19:44:00
我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。...

请问你后来用的什么方法串联表达的？  成功了吗？
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7楼2015-01-05 09:48:05
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lulushuo

铁虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-08 19:44:00
我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。...

请问是什么方法？请赐教！谢谢
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8楼2015-12-30 14:21:24
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