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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

[求助] 串联重复克隆的构建

我想要串联表达一个有23个氨基酸的多肽,共69个碱基。如何做6串重复的?假设我是要接在某基因(用A表示)的后面,串联的(用B表示)。
是合成一段B,然后与A做加端PCR?还是做6xB再与A重复末端PCR?
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 2011-09-05 18:41:45
sayfxxk2u(金币+3): 2011-09-13 11:58:20
做6xB再与A重复末端PCR,成功几率大点。
2楼2011-09-05 13:55:11
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-09-05 13:55:11:
做6xB再与A重复末端PCR,成功几率大点。

嗯,那6XB的,在做PCR的时候是怎么做?直接合成,还是加端,B+B=2B,2B+B=3B,这样加,那条带不是很多?
3楼2011-09-05 14:12:02
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wangnengqiang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎应助 2011-09-08 22:15:04
引用回帖:
3楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-05 14:12:02:
嗯,那6XB的,在做PCR的时候是怎么做?直接合成,还是加端,B+B=2B,2B+B=3B,这样加,那条带不是很多?

直接合成6B,也就三百多碱基对,不贵的,自己一个一个加上去太麻烦了,耗费的试剂费也不少的。
4楼2011-09-05 16:44:45
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wangnengqiang at 2011-09-05 16:44:45:
直接合成6B,也就三百多碱基对,不贵的,自己一个一个加上去太麻烦了,耗费的试剂费也不少的。

一个一个加上,要做一个一串的,还要做个6串的,一串的还是要做,所以,麻烦是麻烦点,没有办法。。
5楼2011-09-08 19:39:51
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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

西瓜: 能不能分享下?哈哈~恭喜了哈! 2011-09-08 22:15:26
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangnengqiang at 2011-09-05 16:44:45:
直接合成6B,也就三百多碱基对,不贵的,自己一个一个加上去太麻烦了,耗费的试剂费也不少的。

我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2011-09-08 19:44:00
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玄小癫

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-08 19:44:00
我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。...

请问你后来用的什么方法串联表达的?  成功了吗?
7楼2015-01-05 09:48:05
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lulushuo

铁虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-08 19:44:00
我已经找到合适的方法了。。
谢谢了。。...

请问是什么方法?请赐教!谢谢
8楼2015-12-30 14:21:24
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