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XI4ZHL

铜虫 (著名写手)

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专业: 动物遗传学

[求助] 转基因问题

各位大虾，我想做转基因，可是我转的基因在小鼠中本来就有，我应该如何确定后代中有没有转成功？是原来的，还是我转进去的？？求各位大虾帮忙，不胜感激！！

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心，是用来使用的，不能搁浅！

1楼 2011-09-04 16:11:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

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专业: 畜牧学

引用回帖:

10楼: Originally posted by XI4ZHL at 2011-09-07 10:57:10:
是啊，我只是验证一下以前师姐构建的载体，别的还没开始，先把能想到的问题想清楚了，再做。你说的稳定表达，RT-PCR我都知道，关键是，我设计的引物是基因全长的，，那我用pcr检测时，克隆出来的是基因全长，那C ...

看你说的核心内容就是CMV的检测，好办，如果整合进去并能稳定表达那就提取基因组DNA直接做PCR检测或者设计探针做southern检测CMV，如果是转基因的小鼠这两种方法只要做好都会出来结果，当然PCR的引物按照CMV的序列来设计，没必要是全场，200-300BP长度就可以。