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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 为何配的SDS electrophoresis running buffer总有沉淀？
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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 为何配的SDS electrophoresis running buffer总有沉淀？

我在配置跑SDS-PAGE用的电泳液时候，先配10倍的，用时在稀释成1倍的，具体配方如下：
250mM Tris base, 1.92 M glycine, 1% SDS, 加水到1L,具体称了 30.3 g Tris base,144.1g Glycine, 10 g SDS,可是最后总是不溶，应该是SDS，之前师兄师姐用的时候都好好的。
加热后溶解了，可是一冷却下来就又析出来了，求教具体怎么回事啊？应该怎么解决呢？

谢谢
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我对人生无悔，奈何心中有愧。。。
1楼 2011-08-31 17:54:39
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 我就是配的10倍的母液啊，用的时候稀释成1倍的，现在10倍的总是没法完全溶解，加热状态下是可以的，可是冷却了就又不行了，很头疼 2011-08-31 19:21:48
SDS应该是配好母液再稀释到终浓度的。SDS是很难溶解的，特别是低温的时候，所以一般要加热才能溶解的。制备分子试剂都是先制备母液再制成工作液的。你可以试试。
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2楼2011-08-31 18:11:38
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
试一下现配现用
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2011-08-31 18:13:21
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yuandian114

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 就是在用之前加热，让它溶解，然后稀释到我要的浓度再用吗？ 2011-08-31 19:20:36
加热一下就溶解了。我也是经常碰到这种情况，配制好了得电泳缓冲液老析出沉淀，加热溶解冷却后一样用的，不影响。
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4楼2011-08-31 18:37:59
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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-08-31 18:13:21:
试一下现配现用

现配很麻烦啊，跑2D，一次要用比较多，之前都是配10倍的，然后稀释，现在也不知道怎么了，唉
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我对人生无悔，奈何心中有愧。。。
5楼2011-08-31 19:22:39
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-08-31 20:02:55
ppt1210(金币+2): 嗯，不行呢，我昨天配好后，加热了一下，没敢温度太高，结果加热搅拌了一天都不行，今天又倒在烧杯里，加热到近乎沸腾了，才溶解了，不过冷却后就又析出了 2011-08-31 20:05:47
现在这种温度还是不能溶解？你如果溶解充分了，现在这种室温放置不会析出来的，我放着都没有的，只有到了冬天的时候会冻住。可能是你溶解没有充分，你可以超声溶解一下，或是再加热溶解看看，估计是没有溶解充分吧。
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6楼2011-08-31 19:56:11
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aderwal

银虫 (小有名气)
楼上说的对。夏天应该是都能溶。只有冬天，室温低的时候才析出。
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7楼2011-08-31 20:08:23
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瓶儿花

金虫 (小有名气)
是不是你的SDS有问题啊？哪里买的啊？
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8楼2011-08-31 20:13:57
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w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 嗯，好的，我试一下，今天重新配一次试试，谢谢 2011-09-01 08:32:16
ppt1210(金币+2): 现在好了，解决了，谢谢哈 2011-09-01 14:25:05
sds溶液不要放到4度冰箱里，无论如何都会析出的。
其次就是，你上面写的这些最好不要全部混一起溶解，我们跑电泳之前才加sds。sds一遇见钾离子就会沉淀的，和高浓度的tris一起是否好溶则未知。
还有，实在不行就配5X的呗，每次稀释5倍，我记得每次用的都是5X的。。
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How about the future？
9楼2011-08-31 20:50:55
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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-08-31 20:13:57:
是不是你的SDS有问题啊？哪里买的啊？

SDS没问题啊，是USB的
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我对人生无悔，奈何心中有愧。。。
10楼2011-09-01 08:31:47
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