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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 为何配的SDS electrophoresis running buffer总有沉淀?

我在配置跑SDS-PAGE用的电泳液时候,先配10倍的,用时在稀释成1倍的,具体配方如下:
250mM Tris base, 1.92 M glycine, 1% SDS, 加水到1L,具体称了 30.3 g Tris base,144.1g Glycine, 10 g SDS,可是最后总是不溶,应该是SDS,之前师兄师姐用的时候都好好的。
加热后溶解了,可是一冷却下来就又析出来了,求教具体怎么回事啊?应该怎么解决呢?

谢谢
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我对人生无悔,奈何心中有愧。。。
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w2boluo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 嗯,好的,我试一下,今天重新配一次试试,谢谢 2011-09-01 08:32:16
ppt1210(金币+2): 现在好了,解决了,谢谢哈 2011-09-01 14:25:05
sds溶液不要放到4度冰箱里,无论如何都会析出的。
其次就是,你上面写的这些最好不要全部混一起溶解,我们跑电泳之前才加sds。sds一遇见钾离子就会沉淀的,和高浓度的tris一起是否好溶则未知。
还有,实在不行就配5X的呗,每次稀释5倍,我记得每次用的都是5X的。。
How about the future?
9楼2011-08-31 20:50:55
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 我就是配的10倍的母液啊,用的时候稀释成1倍的,现在10倍的总是没法完全溶解,加热状态下是可以的,可是冷却了就又不行了,很头疼 2011-08-31 19:21:48
SDS应该是配好母液再稀释到终浓度的。SDS是很难溶解的,特别是低温的时候,所以一般要加热才能溶解的。制备分子试剂都是先制备母液再制成工作液的。你可以试试。
2楼2011-08-31 18:11:38
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yuandian114

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

ppt1210(金币+2): 就是在用之前加热,让它溶解,然后稀释到我要的浓度再用吗? 2011-08-31 19:20:36
加热一下就溶解了。我也是经常碰到这种情况,配制好了得电泳缓冲液老析出沉淀,加热溶解冷却后一样用的,不影响。
4楼2011-08-31 18:37:59
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ppt1210

至尊木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-08-31 18:13:21:
试一下现配现用

现配很麻烦啊,跑2D,一次要用比较多,之前都是配10倍的,然后稀释,现在也不知道怎么了,唉
我对人生无悔,奈何心中有愧。。。
5楼2011-08-31 19:22:39
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