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呼呼xinong

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 3'RACE测序结果求助已有10人参与

本人现在做3race，测序结果存在一种现象，不知各位大侠遇到过没？在此求揭示！本人按照clontech的试剂盒做的结果，pcr，切胶回收，连接后转化，挑单克隆跑pcr，检查到目的条带后每个基因送测10个菌。测序结果都是我要的基因，但是相同基因不同菌落的序列之间存在差异，即在靠近polyA处，序列长短不一，也就是说3’UTR序列长短不一，但是前提条件是短的序列测序结果也含有polyA。请问这是什么现象？如何选择序列？

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1楼 2011-08-31 10:47:12

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hihe99

银虫 (小有名气)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by 音四1990 at 2014-03-09 17:57:46
我还没到测序那一步……不过老师之前跟我说的在克隆时菌落大小和PCR产物大小有一定关系= =
我也不知为毛
不同菌落的测序结果确实会有差异所以RACE一般要测多个克隆
老师说一些小片段测出来会“很有意思” 我还 ...

你给楼主的加油可能晚了吧，11年发的帖子
不过不知道，过了几个月你参透你老师的话没。另外，我也遇到楼主一样的问题了，不知道怎么解决啊。