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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE电泳遇到的问题
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friya0910

新虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE电泳遇到的问题

今天第一次跑SDS-PAGE，用的是伯乐的电泳仪和配套电泳槽，没有说明书之前也没人用过，在设置的时候就设了100V电压，电流什么的都没改，还是默认参数，好像显示的是500mA吧，可是开始跑的时候电流居然到了300-400mA，是不是太大了啊？后来就把电流设为50mA，于是就变成恒流跑了，电压也就20多点，上不去啊？
想请问一下这是怎么回事啊？
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1楼 2011-08-29 16:29:02
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-09-01 16:33:28:
是不是你的缓冲液有问题了？新配个试试，是啊！好像记得电泳恒压，转膜横流，一般设置一个就行，其他条件会跟着你设置的相应改变的。

缓冲液是新配的啊，配方和pH都没有问题，我现在都怀疑是不是槽子有问题了，不过我放冰上跑，电流大倒是对最后结果影响不大，就这么着吧！呵呵……多谢你的指点啊！
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17楼2011-09-01 17:58:02
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
friya0910(金币+2): 2011-08-29 16:50:45
西瓜(金币+2): good 2011-08-29 17:47:35
第一，缓冲液长时间没换
第二，错把缓冲液母液倒进去跑胶
第三，槽子问题或者是封槽子问题，正负极之间有部分相同（垂直胶）
第四，配胶的液体有问题
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-08-29 16:45:19
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-29 16:45:19:
第一，缓冲液长时间没换
第二，错把缓冲液母液倒进去跑胶
第三，槽子问题或者是封槽子问题，正负极之间有部分相同（垂直胶）
第四，配胶的液体有问题

缓冲液是新配的啊，母液是5×的，稀释后才加的啊，槽子应该没有问题吧，是新的伯乐的电泳槽，不太明白“封槽子问题，正负极之间有部分相同”是什么意思。配胶的液体也都是新配的啊，pH也都调过的，会有什么问题呢，郁闷啊……
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3楼2011-08-29 16:50:36
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friya0910

新虫 (正式写手)
西瓜: 你应该说下你用的缓冲液是什么。我们用新的1XTAE是60~80mA，用得越久电流越大，一般到了130mA我们就换缓冲液了。 2011-08-29 17:48:58
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-29 16:45:19:
第一，缓冲液长时间没换
第二，错把缓冲液母液倒进去跑胶
第三，槽子问题或者是封槽子问题，正负极之间有部分相同（垂直胶）
第四，配胶的液体有问题

想问一下，如果正常的情况下，恒压100v跑的话，电流一般都是多少啊？
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-29 16:51:46
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