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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE电泳遇到的问题
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
8楼: Originally posted by friya0910 at 2011-08-29 17:09:01:
我用的是伯乐小型的，为什么这个不能跑100啊？我看网上很多都跑100还有150的呢，我做的不是水平琼脂糖胶，我做的是聚丙烯酰胺凝胶。

这个我也说不上来，有几年没有跑SDS-PAGE了，当时跑高分子谷蛋白用的是恒流，20-30mA，跑了一夜！
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真相是最大的奢侈品
11楼2011-08-29 17:23:26
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
friya0910(金币+2): 2011-09-01 16:01:47
1949stone(金币+2): 欢饮分享经验 2011-09-06 10:44:18
你跑得蛋白是多大的啊？电压太大就跑得快啊！过浓缩胶的时候太快起不到浓缩的效果，接下来跑出来的胶就不好看啦！我记得好像之前跑得蛋白大概是60KDa的蛋白，电压浓缩用的是60多，分离可以适当高点80多，用了三个小时跑完，可以自己摸摸条件，多跑几次就好了。
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人有绝交，才有至交！
12楼2011-08-30 11:10:55
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-08-30 11:10:55:
你跑得蛋白是多大的啊？电压太大就跑得快啊！过浓缩胶的时候太快起不到浓缩的效果，接下来跑出来的胶就不好看啦！我记得好像之前跑得蛋白大概是60KDa的蛋白，电压浓缩用的是60多，分离可以适当高点80多，用了三个 ...

想请问一下你用60V跑的时候电流一般都能到多少啊？
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13楼2011-09-01 16:02:31
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

friya0910(金币+1): 2011-09-01 16:19:14
引用回帖:
13楼: Originally posted by friya0910 at 2011-09-01 16:02:31:
想请问一下你用60V跑的时候电流一般都能到多少啊？

60多v电流大概有20多ma
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人有绝交，才有至交！
14楼2011-09-01 16:11:52
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-09-01 16:11:52:
60多v电流大概有20多ma

我今天用60V跑，电流居然到了200mA，你们跑电泳是不是一般就设个电压，电流和功率都不用设啊，用仪器默认的值就可以了啊？
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15楼2011-09-01 16:20:26
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

friya0910(金币+1): 2011-09-01 17:56:22
引用回帖:
15楼: Originally posted by friya0910 at 2011-09-01 16:20:26:
我今天用60V跑，电流居然到了200mA，你们跑电泳是不是一般就设个电压，电流和功率都不用设啊，用仪器默认的值就可以了啊？

是不是你的缓冲液有问题了？新配个试试，是啊！好像记得电泳恒压，转膜横流，一般设置一个就行，其他条件会跟着你设置的相应改变的。
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16楼2011-09-01 16:33:28
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friya0910

新虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-09-01 16:33:28:
是不是你的缓冲液有问题了？新配个试试，是啊！好像记得电泳恒压，转膜横流，一般设置一个就行，其他条件会跟着你设置的相应改变的。

缓冲液是新配的啊，配方和pH都没有问题，我现在都怀疑是不是槽子有问题了，不过我放冰上跑，电流大倒是对最后结果影响不大，就这么着吧！呵呵……多谢你的指点啊！
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17楼2011-09-01 17:58:02
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by friya0910 at 2011-09-01 17:58:02:
缓冲液是新配的啊，配方和pH都没有问题，我现在都怀疑是不是槽子有问题了，不过我放冰上跑，电流大倒是对最后结果影响不大，就这么着吧！呵呵……多谢你的指点啊！

有的时候换个仪器就好了
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人有绝交，才有至交！
18楼2011-09-01 18:17:52
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小婧子zj

金虫 (小有名气)

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★
friya0910(金币+1): 2011-09-04 14:57:29
1949stone(金币+1): 这个错误很低级 一般不会范吧 2011-09-06 10:45:02
短板在内，长板在外，放对了没？
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19楼2011-09-02 10:07:08
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小婧子zj

金虫 (小有名气)

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friya0910(金币+2): 2011-09-04 14:57:44
内液外液接触没？
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20楼2011-09-02 10:08:46
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