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yixinyuan

木虫 (正式写手)

大凡对地拷贝的打质粒抽提都不太好做。从图看应该是抽提的量低了些,应该再更换溶液多做做看
21楼2011-09-02 22:02:17
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rollandyoung

金虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by yixinyuan at 2011-09-02 22:02:17:
大凡对地拷贝的打质粒抽提都不太好做。从图看应该是抽提的量低了些,应该再更换溶液多做做看

你好,感谢你的建议。能具体说一下重点更换哪些溶液吗?多谢!
22楼2011-09-03 14:52:04
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塞外雨

金虫 (著名写手)

低拷贝质粒,在用试剂盒提取时,我是这样做的,分别按照说明书的操作同时收集几管菌提,分别加入溶液处理,到做到过柱子吸附DNA的时候,这几管只过一根柱子,再洗脱。
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
23楼2011-09-03 16:58:31
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keyasyie

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by rollandyoung at 2011-09-02 12:32:40:
1. 之前按照说明书的反应体系我做过,电泳显示无酶切片段。
2. buffer是按照说明书的要求加的,质粒DNA的量确实是多了一些,原因是我提的质粒DNA就不亮,所以我把质粒的反应量提高了。
3. 继续求助,呵呵!

不知道你用的什么公司的酶
一般来说10X的BUFFER 20ul体系加2ul足够了
质粒DNA浓度低可以多提取几次 然后混在一起 在浓缩纯化一下
分子克隆上的方法很经典 老板没钱就不用买试剂盒了
个人观点 仅供参考 希望对你有帮助
24楼2011-09-03 17:39:15
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rollandyoung

金虫 (小有名气)

感谢楼上两位的的建议,多谢支持,论坛因为有你们而美丽!
25楼2011-09-03 18:34:14
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519034790

新虫 (初入文坛)

我也遇到这样的问题噢
26楼2011-09-03 20:15:27
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thendlee

金虫 (正式写手)

哇哈哈灭菌水。。。。。
27楼2011-10-04 21:16:55
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夜猫放羊

新虫 (初入文坛)

裂解时间长,还是试剂盒东东。质粒裂解会出现多条带
28楼2013-12-12 22:27:22
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