24小时热门版块排行榜    

查看: 3583  |  回复: 27

yixinyuan

木虫 (正式写手)

大凡对地拷贝的打质粒抽提都不太好做。从图看应该是抽提的量低了些,应该再更换溶液多做做看
21楼2011-09-02 22:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rollandyoung

金虫 (小有名气)

引用回帖:
21楼: Originally posted by yixinyuan at 2011-09-02 22:02:17:
大凡对地拷贝的打质粒抽提都不太好做。从图看应该是抽提的量低了些,应该再更换溶液多做做看

你好,感谢你的建议。能具体说一下重点更换哪些溶液吗?多谢!
22楼2011-09-03 14:52:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

塞外雨

金虫 (著名写手)

低拷贝质粒,在用试剂盒提取时,我是这样做的,分别按照说明书的操作同时收集几管菌提,分别加入溶液处理,到做到过柱子吸附DNA的时候,这几管只过一根柱子,再洗脱。
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
23楼2011-09-03 16:58:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

keyasyie

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by rollandyoung at 2011-09-02 12:32:40:
1. 之前按照说明书的反应体系我做过,电泳显示无酶切片段。
2. buffer是按照说明书的要求加的,质粒DNA的量确实是多了一些,原因是我提的质粒DNA就不亮,所以我把质粒的反应量提高了。
3. 继续求助,呵呵!

不知道你用的什么公司的酶
一般来说10X的BUFFER 20ul体系加2ul足够了
质粒DNA浓度低可以多提取几次 然后混在一起 在浓缩纯化一下
分子克隆上的方法很经典 老板没钱就不用买试剂盒了
个人观点 仅供参考 希望对你有帮助
24楼2011-09-03 17:39:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rollandyoung

金虫 (小有名气)

感谢楼上两位的的建议,多谢支持,论坛因为有你们而美丽!
25楼2011-09-03 18:34:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

519034790

新虫 (初入文坛)

我也遇到这样的问题噢
26楼2011-09-03 20:15:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

thendlee

金虫 (正式写手)

哇哈哈灭菌水。。。。。
27楼2011-10-04 21:16:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

夜猫放羊

新虫 (初入文坛)

裂解时间长,还是试剂盒东东。质粒裂解会出现多条带
28楼2013-12-12 22:27:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 rollandyoung 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] NSFC申报书里申请人简历中代表性论著还需要在申报书最后的附件里面再上传一遍吗 20+5 NSFC2026我来了 2026-03-10 14/700 2026-03-15 23:53 by 不负韶华的虎
[考研] 0703化学调剂 290分有科研经历,论文在投 +3 腻腻gk 2026-03-14 3/150 2026-03-15 17:28 by 小物理化学
[基金申请] 国自科面上基金字体 +4 iwuli 2026-03-12 5/250 2026-03-15 17:07 by 风云无泪
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[考研] 331求调剂(0703有机化学 +5 ZY-05 2026-03-13 6/300 2026-03-14 10:51 by Jy?
[考研] 330求调剂 +3 ?酱给调剂跪了 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:13 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] 求调剂,一志愿江南大学环境工程085701 +3 Djdjj12 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:31 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +3 番茄头--- 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:07 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] (081700)化学工程与技术-298分求调剂 +12 11啦啦啦 2026-03-11 35/1750 2026-03-13 21:25 by JourneyLucky
[考研] 329求调剂 +3 miaodesi 2026-03-12 4/200 2026-03-13 20:53 by 18595523086
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 282分材料专业求调剂院校 +18 枫桥ZL 2026-03-09 25/1250 2026-03-13 10:47 by 白夜悠长
[考研] 0857 资源与环境 285分 +6 未名考生 2026-03-09 6/300 2026-03-11 21:08 by 30660438
[考研] 大连大学化学专业研究生调剂 +3 琪久. 2026-03-10 8/400 2026-03-11 10:02 by 琪久.
[考研] 085602化工求调剂 +7 董boxing 2026-03-10 7/350 2026-03-10 17:07 by BruceLiu320
[考研] 一志愿山东大学,总分327,英语二79,有论文,有竞赛,已过四六级 +3 木木目目1 2026-03-09 3/150 2026-03-09 19:52 by yuningshan
信息提示
请填处理意见