| 查看: 461 | 回复: 0 | |||
[求助]
救命啊~~~~~~~关于 Human Park2 gene 和 TOPO vector
|
|
这段时间遇到的实验问题实在非常头痛，请教大家一些问题，谢谢！ 实验目的：想把Human Park2基因克隆到 TOPO vector中。 实验流程：PCR扩增Human Park2基因——克隆PCR产物到TOPO vector中——转化到大肠杆菌DH5a中——质粒提取，酶切检测——测序 遇到问题：1.用pfu Turbo 酶PCR扩增不出Park2 基因， 后来在 Expand Long Template PCR 系统中可PCR扩增基因。 2. Expand Long Template PCR 系统扩增出基因很难克隆到 TOPO vector中。（转化效率其差，测序发现其中有错配碱基） 3. 以Expand Long Template PCR 扩增产物为模板，用pfu Turbo 酶扩增Park2 基因，转化后酶切检测后发现 质粒都是空的。（似乎一些引物的二聚体被克隆到质粒中了） 各位高人给点意见吧，有没有哪个实验做PARK2基因的，要不借点用用吧？ 救命啊~~~~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~
各位大侠，考山大微生物学专业博士，关于分子生物学专业的咨询
已经有7人回复
- 关于硅能带图和态密度分析
已经有11人回复
- RT-PCR 产量低！江湖告急！老板，大侠救命啊！
已经有14人回复
- 有做药芯焊丝配方的高手吗？ 救命啊~~~
已经有12人回复
- 求教，思想政治教育读博的前辈们，毕业后做什么啊？
已经有10人回复
- 【求助/交流】vector
已经有10人回复
- 【求助】粉末冶金铁素体不锈钢用啥子腐蚀液啊？
已经有10人回复
点击这里搜索更多相关资源科研从小木虫开始，人人为我，我为人人
