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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 那种DNA修饰酶可以补平修复双链DNA？
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cexoihtydx

金虫 (正式写手)

[求助] 那种DNA修饰酶可以补平修复双链DNA？

提取的基因组DNA（>15kb），常存在DNA双链中间的缺刻和链末端的切口，请问那一种DNA修饰酶可以补平修复缺刻和切口。最好注明修饰酶的商品名和生产商。非常感谢！
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不放弃，日子总有阳光，追求总有希望！
1楼 2011-08-27 15:47:01
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-08-27 23:26:32
可以用Klenow补平
T4连接酶
每个公司都有得卖
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真相是最大的奢侈品
2楼2011-08-27 22:00:14
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cexoihtydx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-27 22:00:14:
可以用Klenow补平
T4连接酶
每个公司都有得卖

T4聚合酶还是连接酶？还需要用到klenow吗？
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不放弃，日子总有阳光，追求总有希望！
3楼2011-08-27 22:48:43
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★ ★
cexoihtydx(金币+10): 2011-08-28 00:11:19
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利~ 2011-08-28 14:00:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by cexoihtydx at 2011-08-27 22:48:43:
T4聚合酶还是连接酶？还需要用到klenow吗？

T4连接酶连接双链中有条链内部断开的
klenow是用来补平末端的或者内部有单链有缺的
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真相是最大的奢侈品
4楼2011-08-27 23:05:13
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
T4聚合酶可以代替klenow
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真相是最大的奢侈品
5楼2011-08-27 23:06:25
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cexoihtydx

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wanhscn at 2011-08-27 23:06:25:
T4聚合酶可以代替klenow

请问一下，进行这种缺口填充和补平的酶，不需加入引物吧？你所指的klenow是DNA聚合酶I(klenow)大片段，还是Klenow 片段（无3‘--5’外切酶活性）？谢谢
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不放弃，日子总有阳光，追求总有希望！
6楼2011-08-28 10:14:42
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
引用回帖:
6楼: Originally posted by cexoihtydx at 2011-08-28 10:14:42:
请问一下，进行这种缺口填充和补平的酶，不需加入引物吧？你所指的klenow是DNA聚合酶I(klenow)大片段，还是Klenow 片段（无3‘--5’外切酶活性）？谢谢

Klenow片段。如果外切活性太强了，条件不好控制，容易破坏DNA。
这个具体要看你的实验目的
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真相是最大的奢侈品
7楼2011-08-28 10:28:10
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