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zaitaxiang01

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+1): 更希望做过之后的经验分享一下,大奖等你来拿。 2011-09-18 15:06:21
打算做RNA电泳,来学习下
51楼2011-09-18 09:48:15
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蓝慧

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 1949stone at 2011-08-21 16:48:21:
同学分享给我 我再次分享

准备干净的配胶板和电泳槽         注意DNA酶污染的仪器可能会降解DNA,造成条带信号弱、模糊甚至缺失的现象。

选择电泳方法         一般的核酸检测只需要琼脂糖凝胶电泳就可以;如果需要分辨 ...

太经典了
向着目标前进!
52楼2011-09-21 19:07:59
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骄阳微肆

银虫 (初入文坛)

★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 操作步骤,算得上经验?希望多分享做过的经验总结 2011-09-22 08:03:08
一  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
   配制溶液:
  1、30% Acrylamide(14.5 g 丙烯酰胺,0.5g 双丙烯酰胺,加水溶解,定容至50 ml,4℃,棕色瓶中储存)
  2、 10% 过硫酸铵 (0.5g APS,溶于5ml 去离子水中,4℃可储存数个月)
  3、 10 ×TBE 缓冲液(10.8g Tris,0.744g EDTA,5.5g 硼酸,定容到100ml)
  4、TEMED
  5、20-200 DNA marker
   
实验步骤:
1、        配置10%的胶 10ml: 5 ml water
2.5ml 40% Acrylamide
                        2 ml 5 ×TBE
                       0.11ml APS(现配现用)
                       0.01mlTEMED
2、        立即将胶倒入两块板间并插好梳子,放置,待凝固30min,时间可以适当延长。
3、        向电泳槽加入1×TBE,拔出梳子并用注射针筒多次洗涤点样孔,尽可能排除未聚合的丙烯酰胺。
4、        将DNA marker 加到点样孔中,以100V(10V/cm)进行电泳直到燃料走到靠近底部的三分之一处,大约需要60-90分钟。
努力搞科研
53楼2011-09-21 21:01:30
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liuchenammk

铜虫 (初入文坛)


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向师兄师姐学习!!!
54楼2011-09-21 22:30:30
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

初次做电泳,师兄师姐帮忙看一下,谢谢
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3622275&fpage=1
琼脂糖电泳
人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
55楼2011-09-22 08:05:36
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jove0717

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
请教:使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析蛋白在200~300kD,胶应该用什么交联度,什么浓度呢
快乐科研,学无止境
56楼2011-09-22 10:05:11
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小白虾

木虫 (正式写手)

飞的更高
57楼2011-09-23 11:43:46
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
58楼2011-09-24 08:13:46
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Netherland

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+1): 欢迎来交流 2011-09-28 07:09:08
好贴,拿来看看,谢谢
59楼2011-09-27 17:22:00
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Netherland

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
非常好的帖子,借来看看,谢谢啊
60楼2011-09-27 17:26:54
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