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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主

[交流] 分子生物版之电泳专题-重金奖励 已有45人参与

我们学生物的会遇到很多电泳的问题，琼脂糖，SDS-PAGE等等。

开本帖的目的就是希望虫友们能把遇到的各种电泳，电泳试验方案，试验中遇到的问题以及解决方案，小经验，小总结分享出来。达到资源共享。
讲诉范围不限，只要是关于电泳的，电泳液，pH，电压，胶的制备等等各个方面都可以。最好是自己亲身经历的。

奖励措施：只要合理奖励5-50金币，EPI不等。
电泳试验方案列出一般奖励不多，方案一般都统一化了。对于试验中遇到的问题以及解决方案，小经验，小总结的分享，会重金奖励

欢迎大家积极参与。

本活动的目的：当虫友遇到电泳问题的时候，希望只要看这一个帖子就可以解决问题。

[ Last edited by dhd997 on 2011-8-28 at 09:59 ]
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
1楼 2011-08-21 10:04:43
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骄阳微肆

银虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+2): 操作步骤，算得上经验？希望多分享做过的经验总结 2011-09-22 08:03:08
一  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
   配制溶液：
  1、30% Acrylamide（14.5 g 丙烯酰胺，0.5g 双丙烯酰胺，加水溶解，定容至50 ml，4℃，棕色瓶中储存）
  2、 10% 过硫酸铵 （0.5g APS，溶于5ml 去离子水中，4℃可储存数个月）
  3、 10 ×TBE 缓冲液（10.8g Tris,0.744g EDTA,5.5g 硼酸，定容到100ml）
  4、TEMED
  5、20-200 DNA marker
   
实验步骤：
1、        配置10%的胶 10ml： 5 ml water
2.5ml 40% Acrylamide
                        2 ml 5 ×TBE
                       0.11ml APS（现配现用）
                       0.01mlTEMED
2、        立即将胶倒入两块板间并插好梳子，放置，待凝固30min，时间可以适当延长。
3、        向电泳槽加入1×TBE，拔出梳子并用注射针筒多次洗涤点样孔，尽可能排除未聚合的丙烯酰胺。
4、        将DNA marker 加到点样孔中，以100V（10V/cm）进行电泳直到燃料走到靠近底部的三分之一处，大约需要60-90分钟。
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努力搞科研
53楼2011-09-21 21:01:30
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
Electrophoresis in Practice
A Guide to Methods and Applications
of DNA and Protein Separations
Fourth, revised and enlarged Edition
in collaboration with
Sonja Gronau
Phil Becket
Josef Blles
Hanspeter Schickle
Gnter Theßeling

发布一本书吧
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海纳百川止于至善
2楼2011-08-21 13:20:48
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+20, MolEPI+1): 第一个参与者，重金奖励。 2011-08-21 13:44:08
Electrophoresis in Practice
A Guide to Methods and Applications
of DNA and Protein Separations
Fourth

[ Last edited by 1949stone on 2011-8-21 at 13:44 ]
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fdfbox
海纳百川止于至善
3楼2011-08-21 13:21:32
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+1): 来点实在的。不嫌说的多 2011-08-21 16:39:46
好帖，必须顶。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-08-21 16:27:47
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