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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人,我型我秀!

优秀版主

[交流] 分子生物版之电泳专题-重金奖励 已有45人参与

我们学生物的会遇到很多电泳的问题,琼脂糖,SDS-PAGE等等。

开本帖的目的就是希望虫友们能把遇到的各种电泳,电泳试验方案,试验中遇到的问题以及解决方案,小经验,小总结分享出来。达到资源共享。
讲诉范围不限,只要是关于电泳的,电泳液,pH,电压,胶的制备等等各个方面都可以。最好是自己亲身经历的。


奖励措施:只要合理奖励5-50金币,EPI不等。
电泳试验方案列出一般奖励不多,方案一般都统一化了。对于试验中遇到的问题以及解决方案,小经验,小总结的分享,会重金奖励


欢迎大家积极参与。

本活动的目的:当虫友遇到电泳问题的时候,希望只要看这一个帖子就可以解决问题。

[ Last edited by dhd997 on 2011-8-28 at 09:59 ]
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人生不过几十年,成败荣辱都在天,是非恩怨莫在意,健康快乐最值钱,自古人间苦无边,看得高远境如仙,愿你不为凡事恼,轻松快乐每一天。
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骄阳微肆

银虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+2): 操作步骤,算得上经验?希望多分享做过的经验总结 2011-09-22 08:03:08
一  非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
   配制溶液:
  1、30% Acrylamide(14.5 g 丙烯酰胺,0.5g 双丙烯酰胺,加水溶解,定容至50 ml,4℃,棕色瓶中储存)
  2、 10% 过硫酸铵 (0.5g APS,溶于5ml 去离子水中,4℃可储存数个月)
  3、 10 ×TBE 缓冲液(10.8g Tris,0.744g EDTA,5.5g 硼酸,定容到100ml)
  4、TEMED
  5、20-200 DNA marker
   
实验步骤:
1、        配置10%的胶 10ml: 5 ml water
2.5ml 40% Acrylamide
                        2 ml 5 ×TBE
                       0.11ml APS(现配现用)
                       0.01mlTEMED
2、        立即将胶倒入两块板间并插好梳子,放置,待凝固30min,时间可以适当延长。
3、        向电泳槽加入1×TBE,拔出梳子并用注射针筒多次洗涤点样孔,尽可能排除未聚合的丙烯酰胺。
4、        将DNA marker 加到点样孔中,以100V(10V/cm)进行电泳直到燃料走到靠近底部的三分之一处,大约需要60-90分钟。
努力搞科研
53楼2011-09-21 21:01:30
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
Electrophoresis in Practice
A Guide to Methods and Applications
of DNA and Protein Separations
Fourth, revised and enlarged Edition
in collaboration with
Sonja Gronau
Phil Becket
Josef Blles
Hanspeter Schickle
Gnter Theßeling

发布一本书吧
海纳百川止于至善
2楼2011-08-21 13:20:48
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1949stone

荣誉版主 (知名作家)

海纳百川

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+20, MolEPI+1): 第一个参与者,重金奖励。 2011-08-21 13:44:08
Electrophoresis in Practice
A Guide to Methods and Applications
of DNA and Protein Separations
Fourth

[ Last edited by 1949stone on 2011-8-21 at 13:44 ]

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

海纳百川止于至善
3楼2011-08-21 13:21:32
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
dhd997(金币+1): 来点实在的。不嫌说的多 2011-08-21 16:39:46
好帖,必须顶。。。
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-08-21 16:27:47
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