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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 分子生物版之电泳专题-重金奖励
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dhd997

荣誉版主 (文坛精英)

自由人，我型我秀！

优秀版主
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 不错！ 2011-09-13 15:25:16
分子生物学实验常用试剂、缓冲液的配制方法
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=2242897&fpage=7
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人生不过几十年，成败荣辱都在天，是非恩怨莫在意，健康快乐最值钱，自古人间苦无边，看得高远境如仙，愿你不为凡事恼，轻松快乐每一天。
41楼2011-09-12 08:37:02
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博杰冲

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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wanhscn(金币+2): 鼓励常来分子生物版！ 2011-09-13 15:24:31
跑电泳的时候还要考虑电泳液时间是否久了的问题。
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42楼2011-09-12 15:27:43
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小鸟剑客

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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wanhscn(金币+5): 鼓励！ 2011-09-13 15:23:51
1如果PCR后跑电泳验证DNA的话还要注意引物设计，不然会出现杂带和引物二聚体
2点样的时候也要快，关键是熟练度，不然等你后面的点完样，前面的都弥散了，也跑不出好胶来
3琼脂糖凝胶的浓度与线性DNA的最佳分辨范围是
琼脂糖凝胶的浓度           线性DNA（bp）
0.5％                       1000-30000
0.7％                       800-12000           
1.0％                        500-10000
1.2％                        400-7000
1.5％                        200-3000
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43楼2011-09-13 14:42:10
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+15, MolEPI+1): good 2011-09-13 17:40:03
我在SDS-PAGE中犯的错误
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3591880&fpage=1
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真相是最大的奢侈品
44楼2011-09-13 17:08:33
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thetc

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+5): 不错 2011-09-15 15:35:18
电泳时配置琼脂糖凝胶时应该用纯净水或者去离子水配置，若所含盐离子过多会导致琼脂糖无法形成凝胶。可以用哇哈哈矿泉水作为纯净水。
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加入，希望能学习多一点
45楼2011-09-15 09:28:56
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新的一年
★
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顶。。。。。。。。。
46楼2011-09-15 10:26:28
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跳跳鱼

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 试验步骤就是这么说的吧？还是鼓励一下 2011-09-15 18:25:29
在做聚丙烯酰胺凝胶时有浓缩胶和分离胶  分离胶在下 浓缩胶在上分离胶和浓缩胶的浓度不同。而且再加入分离胶之后过15分钟再加浓缩胶。  最后缓冲液要使胶全部浸泡在缓冲液内。   一点体会
！！！
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快乐奋斗，创造所有。
47楼2011-09-15 17:13:27
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青星如雨

新虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+5): 是值得注意啊，以后小心点 2011-09-16 12:36:13
我是新手，做了几次SDS-PAGE，老是犯错，不是忘了加梳子就是梳子拔早了孔给堵住了，还有一次等胶要凝的快好了才去插梳子，咔，玻璃坏了。还有个哥们卡玻璃的时候一用力，两块都破了
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做自己喜欢做的
48楼2011-09-16 10:00:18
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)
★
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dhd997: 可以啊 2011-09-17 09:18:31
有没有关于RNA电泳的？
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49楼2011-09-16 20:15:39
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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dhd997(金币+10): 有意思 2011-09-17 09:18:57
关于电泳液我有个自己的经验，或者可以称为教训。
我们实验室一直用1*TAE做电泳液，有次冰乙酸没有了，临时决定用TBE做电泳缓冲液。我接下来的实验是要切胶回收的，用的国产tiangen试剂盒，后面的两个月我一直在重复回收连接，怎么连也连不到载体上。
后来逐个排除，原来问题出在了TBE上面，硼酸可以和DNA结合，不利于后续连接反应（至少对国产胶回收试剂盒是如此）。
希望我白白浪费两个月时间的教训能给大家以启发。
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一直向前！
50楼2011-09-17 09:14:58
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