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duannuo

金虫 (小有名气)

[求助] 为何我不加模板也能跑出跟加了模板一样的条带呢?

加了模板(100bp)的有条带,不加模板的还是有条带,奇怪的是位置还一样,也在100bp左右,我的引物是22bp,在电泳里没看到引物二聚体条带,做了很多遍,也换了很多条件,试剂什么的都换了新的,还是这样,求高人指点,不甚感激啊啊啊啊
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
duannuo(金币+1): 2011-08-20 18:00:22
西瓜(金币+2): 天使君,好久不见啊 2011-08-20 22:02:25
你的PCR体系中的什么东西是不是比污染了?不然为什么不加模板也会出条带呢?

还有你做PCR目的条带是多大?是100bp吗?
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-20 12:25:40
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DXY1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


duannuo(金币+2): 谢谢关注 2011-08-20 18:00:08
西瓜(金币+1): 欢迎新虫交流 2011-08-20 22:02:47
有可能是你的枪有污染,经常的使用,会在枪口留下少许的DNA,也许这个造成的吧,试一下换个别人的枪试试,我以前也遇见过,换了枪就好了
3楼2011-08-20 12:27:17
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duannuo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by DXY1 at 2011-08-20 12:27:17:
有可能是你的枪有污染,经常的使用,会在枪口留下少许的DNA,也许这个造成的吧,试一下换个别人的枪试试,我以前也遇见过,换了枪就好了

枪是新的
4楼2011-08-20 12:53:57
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duannuo

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-20 12:25:40:
你的PCR体系中的什么东西是不是比污染了?不然为什么不加模板也会出条带呢?

还有你做PCR目的条带是多大?是100bp吗?

谢谢你的关注,我的PCR体系中的所有试剂都换了新的,不应该存在污染,目的条带是87bp
5楼2011-08-20 12:55:17
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-20 22:03:37
不加模板也能出条带,可以换一下别的聚合酶和延伸温度试试。引物二聚体看不见要么是跑出去了,要么是失效了,还会有什么问题嘞
生活的乐趣在于善于发现美,学会欣赏美
6楼2011-08-20 20:05:26
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