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duannuo

金虫 (小有名气)

[求助] 为何我不加模板也能跑出跟加了模板一样的条带呢？

加了模板（100bp）的有条带，不加模板的还是有条带，奇怪的是位置还一样，也在100bp左右，我的引物是22bp，在电泳里没看到引物二聚体条带，做了很多遍，也换了很多条件，试剂什么的都换了新的，还是这样，求高人指点，不甚感激啊啊啊啊
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1楼 2011-08-20 12:20:24
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

★ ★
duannuo(金币+1): 2011-08-20 18:00:22
西瓜(金币+2): 天使君，好久不见啊 2011-08-20 22:02:25
你的PCR体系中的什么东西是不是比污染了？不然为什么不加模板也会出条带呢？

还有你做PCR目的条带是多大？是100bp吗？
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-08-20 12:25:40
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DXY1

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
duannuo(金币+2): 谢谢关注 2011-08-20 18:00:08
西瓜(金币+1): 欢迎新虫交流 2011-08-20 22:02:47
有可能是你的枪有污染，经常的使用，会在枪口留下少许的DNA，也许这个造成的吧，试一下换个别人的枪试试，我以前也遇见过，换了枪就好了
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3楼2011-08-20 12:27:17
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duannuo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by DXY1 at 2011-08-20 12:27:17:
有可能是你的枪有污染，经常的使用，会在枪口留下少许的DNA，也许这个造成的吧，试一下换个别人的枪试试，我以前也遇见过，换了枪就好了

枪是新的
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4楼2011-08-20 12:53:57
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duannuo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-20 12:25:40:
你的PCR体系中的什么东西是不是比污染了？不然为什么不加模板也会出条带呢？

还有你做PCR目的条带是多大？是100bp吗？

谢谢你的关注，我的PCR体系中的所有试剂都换了新的，不应该存在污染，目的条带是87bp
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5楼2011-08-20 12:55:17
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xbl3688

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-20 22:03:37
不加模板也能出条带，可以换一下别的聚合酶和延伸温度试试。引物二聚体看不见要么是跑出去了，要么是失效了，还会有什么问题嘞
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生活的乐趣在于善于发现美，学会欣赏美
6楼2011-08-20 20:05:26
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