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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？
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nnsulei

金虫 (正式写手)

[交流] 5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？ 已有13人参与

5--6KB的基因片段多长时间扩增？用什么样的酶好呢？
LA Taq可以吗?要多长时间呢。图个便宜呗哈哈～～～
谢谢各位，问题解决了！片段太长，以基因组为模板总是弥散带，干脆最后就分段P了。呵呵

[ Last edited by nnsulei on 2011-8-22 at 14:08 ]
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努力做就有结果～
1楼 2011-08-19 11:11:03
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Arrennew

铁杆木虫 (正式写手)
★
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1. LA Taq 我扩过10K的，1kb/m，末端部分加A ，天根，takara都行，300块左右吧。
2. NEB公司的Phusion 超保真酶, 我扩过4K的，2-4kb/m，快，保真，平末端，1200块左右吧。
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生命不息，探索不止。
12楼2011-08-20 23:05:59
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liukgg

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): good 2011-08-19 12:01:58
一般来说普通Taq酶扩增速度是每分钟1kb，高保真Taq酶是每分钟750个碱基左右
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山水凤凰
2楼2011-08-19 11:31:15
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
★ ★ ★ ★
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1949stone(金币+3): 可以考虑 2011-08-19 13:19:11
Taq plus 吧。。。是taq酶和PFU酶的混合物，保真性比较高一点。
扩增那么长的话，延伸时间5min吧。。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-08-19 12:15:02
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空谷幽风

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
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西瓜(金币+2): 有道理啊 2011-08-19 18:44:26
这么长的片段不太好扩，即使扩出来也未必会全部正确；所以建议你分段扩，各段都正确后再拼接
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
5楼2011-08-19 14:28:50
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